人膠質(zhì)瘤細(xì)胞兩株亞系Mdm2與p53相關(guān)蛋白的異質(zhì)性分析.pdf

1、　　目的：(1) 以Mdm2和p53為靶點(diǎn)探討人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SWO-38兩株亞系SWOZ1和SWOZ2異質(zhì)性的蛋白質(zhì)分子機(jī)制；(2) 探討免疫共沉淀技術(shù)在腫瘤異質(zhì)性蛋白質(zhì)分子機(jī)制研究中的可行性,為腫瘤異質(zhì)性研究建立一種新的研究方法。
　　方法：(1) 采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SWO-38及其兩亞系SWOZ1、SWOZ2中Mdm2和p53蛋白質(zhì)的表達(dá)部位及水平；(2) 采用Western blot法進(jìn)一步檢測(cè)SWO-3

2、8及其兩亞株中Mdm2及p53蛋白質(zhì)的表達(dá)水平；(3) 應(yīng)用免疫共沉淀技術(shù)檢測(cè)兩亞系SWOZ1、SWOZ2中Mdm2和p53相關(guān)蛋白表達(dá)譜的差異。
　　結(jié)果：(1) Mdm2和p53于人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞SWO-38及其兩亞系SWOZ1、SWOZ2的胞核中均呈陽(yáng)性表達(dá),且三者表達(dá)量相當(dāng)；(2) 在SWO-38及其兩亞系中均檢測(cè)到Mdm2和p53蛋白質(zhì)的表達(dá),且表達(dá)量相當(dāng)；(3) 在Mdm2免疫共沉淀物中,Mr 37000處有一蛋白條帶S

3、WOZ2明顯深染于SWOZ1；在p53的免疫共沉淀物電泳圖譜中,同樣可清楚的看到在Mr 39000和38000兩處蛋白條帶均SWOZ1深染于SWOZ2；而在Mr 37000處一蛋白條帶SWOZ2明顯深染于SWOZ1。
　　結(jié)論：(1) 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞兩亞系SWOZ1和SWOZ2中,在Mdm2傳導(dǎo)通路于Mr約37000處的某蛋白表達(dá)量明顯不同；p53傳導(dǎo)通路中Mr約39000、38000、37000的三個(gè)蛋白在兩亞株中表達(dá)量存在顯著差

4、異。此些差異蛋白可能對(duì)膠質(zhì)瘤異質(zhì)性的產(chǎn)生起重要作用,并可能是決定兩亞株細(xì)胞表現(xiàn)不同生物學(xué)行為的關(guān)鍵。(2) 在Mdm2和p53的免疫共沉淀物中,Mr 37000處的蛋白均為SWOZ2高表達(dá)于 SWOZ1,初步推斷兩者可能具有相似的分子量或結(jié)構(gòu),是Mdm2和p53相互調(diào)節(jié)的交叉點(diǎn),此步尚需測(cè)序后進(jìn)一步鑒定。(3) 用免疫共沉淀技術(shù)探討腫瘤異質(zhì)性的蛋白質(zhì)分子機(jī)制是一條很好的途徑；(4) SWOZ1和SWOZ2兩株細(xì)胞亞系可為進(jìn)一步研究膠質(zhì)瘤