PSCAmRNA在膀胱和腎組織中的表達及其意義.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文PSCAmRNA在膀胱和腎組織中的表達及其意義姓名：溫曉飛申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（泌尿外科）指導(dǎo)教師：孫穎浩2003050100級傾上論文PSCAmRNA在膀胱和腎組織中的表達及其意義中文摘要[背景]前列腺干細胞抗原(PSCA，prostatestemcellantigen)是一個新發(fā)現(xiàn)的腫瘤相關(guān)性細胞表面抗原，為Ly一6細胞表面抗原家族成員之一，其作用尚不清楚，推測可能與細胞分化、同型細胞的細胞間粘附、

2、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。近年的研究主要集中于PSCA在不同前列腺組織中的表達，并形成了較為一致的觀點，認(rèn)為PSCA在約80％的CaP中呈高表達，且激素依賴和非激素依賴型CaP之間無明顯差異：在CaP的骨轉(zhuǎn)移灶中幾乎全部呈高表達且表達水平較原發(fā)灶更高；因此提出PSCA可能成為腫瘤免疫診斷和免疫治療的一個理想靶抗原。隨后的研究中發(fā)現(xiàn)，正常膀胱移行上皮、胎盤滋養(yǎng)層等亦有少量的PSCA表達，在部分膀胱癌和胰腺癌中似乎存在PSCA的過表達。而PSCA在泌尿

3、系腫瘤中的表達方面，國外的研究較少，國內(nèi)尚未見PSCA研究的相關(guān)報道。因此，系統(tǒng)地研究PSCA在泌尿系正常組織及相應(yīng)腫瘤中的表達情況，對尋找新的泌尿系腫瘤相關(guān)靶向抗原及其可能在免疫診斷和治療上的應(yīng)用有著重要的意義。[目的]本課題利用ISH技術(shù)，檢測PSCAmRNA在正常膀胱和腎臟組織以及在膀胱移行細胞癌和腎細胞癌中的表達水平，進一步研究和完善PSCA在常見泌尿系統(tǒng)腫瘤中的表達情況，為探討PSCA在泌尿系腫瘤的免疫診斷與免疫治療方砸的應(yīng)用

4、價值提供理論依據(jù)。[方法](1)根據(jù)已知PSCA的全長序列，采用RTPCR的方法，克隆出PSCA基因編碼框中部分片段，并裝入pMDl8T克隆載體保存；(2)將目的基因片段轉(zhuǎn)入含特異性SP6／T7RNA聚合酶啟動子序列的pcDNA3載體，轉(zhuǎn)染JMl09大腸桿菌，擴增后用體外轉(zhuǎn)錄法制各地高辛標(biāo)記的反義cRNA探針：(3)標(biāo)本采用新鮮手術(shù)切除組織，4％多聚甲醛固定，石蠟包埋，利用ISH技術(shù)，對20例正常膀胱組織、5例膀胱粘膜不典型增生及64例