HMGA1和HAND1在喉癌組織中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的:喉癌作為耳鼻咽喉-頭頸外科常見的惡性腫瘤之一，近年來其發(fā)病率有逐年上升趨勢(shì)。喉癌的發(fā)生、發(fā)展及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素、多階段和多基因參與的過程，由多種癌基因的激活、抑癌基因的失活及凋亡基因的失控相互作用引起的。HMGA1蛋白是屬于高遷移率族(hish mobility group，HMG)蛋白家族成員，HMGA1在調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄、DNA復(fù)制、細(xì)胞周期中的染色質(zhì)變化、染色質(zhì)重構(gòu)等方面發(fā)揮著重要的作用。HMGA1與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)

2、。HAND1(又名eHand/Hxt/Thing1)屬于bHLH（堿性螺旋-環(huán)-螺旋）Twist亞家族成員的轉(zhuǎn)錄因子，在滋養(yǎng)層巨細(xì)胞分化和心臟形成過程中發(fā)揮重要作用，對(duì)細(xì)胞增殖以及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展也有重要影響。本研究以喉鱗癌為研究對(duì)象，探討HMGA1和HAND1在喉鱗癌及癌旁正常粘膜的表達(dá)，進(jìn)一步了解兩者在喉鱗癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的作用及兩者之間的相互關(guān)系。
　　 方法:
　　 1、應(yīng)用免疫組織化學(xué)(immu

3、nohistochemistry,IHC)Envision二步法檢測(cè)42例喉鱗癌組織，25例癌旁喉正常粘膜中HMGA1和HAND1基因的蛋白表達(dá)情況。
　　 2、應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)42例新鮮喉鱗癌及25例癌旁喉正常粘膜中HMGA1和HAND1的mRNA表達(dá)情況。
　　 3、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以P＜0.05為差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著意義，以P＜0.01為差異在

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、HMGA1在喉鱗癌和癌旁喉正常粘膜中的表達(dá)及其與臨床參數(shù)之間的關(guān)系。
　　 1.1、免疫組化法:應(yīng)用Envision二步法檢測(cè)42例喉鱗癌組織和25例癌旁喉正常粘膜中HMGA1蛋白表達(dá)情況，陽性表達(dá)率分別為71.43％(30/42)和20.00％(5/25)，前者明顯高于后者，二者統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異具有非常顯著性意義(P＜0.01)，HMGA1在喉鱗癌組織中的蛋白表達(dá)明

5、顯高于癌旁喉正常粘膜組織。在喉鱗癌中HMGA1的蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)(P＜0.05），而與腫瘤病理學(xué)分級(jí)、臨床分型及年齡分組無關(guān)(P＞0.05)。
　　 1.2、RT-PCR法:應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)42例喉鱗癌組織和25例癌旁喉正常粘膜組織中HMGA1 mRNA的表達(dá)情況，其相對(duì)表達(dá)量分別為1.25±0.21和0.96±0.33，前者明顯高于后者，二者統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異具有非常顯著性意義(P＜0.01)。HMGA1在喉

6、鱗癌組織中的mRNA表達(dá)明顯高于癌旁喉正常粘膜組織(P＜0.01);在喉鱗癌中HMGA1 mRNA的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05）、臨床分期(P＜0.01）相關(guān)，而與腫瘤病理學(xué)分級(jí)、臨床分型及年齡分組無關(guān)(P＞0.05）。
　　 2、HAND1在喉鱗癌和癌旁喉正常粘膜中的表達(dá)及其與臨床參數(shù)之間的關(guān)系
　　 2.1、免疫組化法:應(yīng)用Envision二步法檢測(cè)42例喉鱗癌組織和25例癌旁喉正常粘膜組織中的HAND1蛋白表達(dá)

7、情況，陽性表達(dá)率分別為35.71％(15/42)和76.00％(19/25)，前者明顯低于后者，二者統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異具有非常顯著性意義(P＜0.01)，HAND1在喉鱗癌組織中的蛋白表達(dá)明顯低于癌旁正常粘膜組織;在喉鱗癌中HAND1的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期以及病理分級(jí)(P＜0.05）相關(guān)，而與臨床分型及年齡分組無關(guān)(P＞0.05）。
　　 2.2、RT-PCR法:應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)42例喉鱗癌組織和25例癌旁喉正常粘膜中的H

8、AND1 mRNA的表達(dá)情況，其相對(duì)表達(dá)量分別為0.16±0.37和0.82±0.16，前者明顯低于后者，二者統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異具有非常顯著性意義(P＜0.01)。HAND1在喉鱗癌組織中的mRNA表達(dá)明顯低于癌旁喉正常粘膜組織;在喉鱗癌中HAND1的mRNA表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期以及病理分級(jí)(P＜0.05）相關(guān)，而與臨床分型及年齡分組無關(guān)(P＞0.05）。
　　 3、相關(guān)性:在mRNA水平，HMGA1與HAND1表達(dá)成直線負(fù)相關(guān)

9、(r=-0.998,P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1、HMGA1和HAND1在喉鱗癌組織及癌旁喉正常粘膜組織中均有表達(dá)。
　　 2、在喉鱗癌組織中，HMGA1呈高表達(dá)而HAND1呈低表達(dá)，提示兩者可能與喉鱗癌的發(fā)生相關(guān)。
　　 3、在喉鱗癌組織中，HMGA1呈高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期相關(guān)而與腫瘤病理學(xué)分級(jí)、臨床分型及年齡分組無關(guān);HAND1呈低表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期以及病理分級(jí)相關(guān)，而與臨