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1、目的:本論文旨在通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究,觀察補(bǔ)腎促排卵系列方對(duì)雄激素致排卵障礙大鼠卵巢組織形態(tài)學(xué)變化,并從腫瘤壞死因子(TNF-ɑ),表皮生長(zhǎng)因子(EGF),轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-1),白介素-1(IL-1)方面,進(jìn)一步探討補(bǔ)腎促排卵系列方的作用機(jī)制,為排卵障礙性不孕癥的治療提供更加開(kāi)廣闊的科研思路和臨床治療依據(jù)。
方法:本實(shí)驗(yàn)選用 SD雌性大鼠,于出生第九天注射丙酸睪丸酮制作雄激素致排卵障礙大鼠模型。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為7組,即序貫高劑
2、量組、序貫低劑量組、補(bǔ)腎填精方高劑量組、補(bǔ)腎填精方低劑量組、枸櫞酸氯米芬組、空白對(duì)照組及模型對(duì)照組。同種飼養(yǎng)條件下,分籠喂養(yǎng),每日定時(shí)灌胃給藥1次。序貫高劑量組給藥劑量為補(bǔ)腎填精方29g/kg(以生藥量計(jì)),序貫低劑量為14.5g/kg,補(bǔ)腎活血方(以生藥量計(jì))24g/kg、12g/kg,每方各連續(xù)灌胃3天,交替進(jìn)行,6天為一個(gè)周期。補(bǔ)腎填精方高、低劑量組給藥劑量分別為29g/kg、14.5g/kg。補(bǔ)腎填精高劑量相當(dāng)于臨床劑量的6.7
3、倍,補(bǔ)腎填精低劑量相當(dāng)于臨床劑量的3.35倍。枸櫞酸氯米芬組給藥劑量為5.58mg/kg,相當(dāng)于臨床劑量的6.7倍。各組用藥體積均為20ml/kg??瞻讓?duì)照組和模型對(duì)照組給予等量去離子水。均連續(xù)給藥30天。給藥30天后,觀察陰道細(xì)胞涂片,挑選處于動(dòng)情期的大鼠,進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定。卵巢用甲醛固定,再脫水包埋,用HE染色法染色,光學(xué)顯微鏡下觀察卵巢組織形態(tài),用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)大鼠血清內(nèi)腫瘤壞死因子-ɑ(TNF-ɑ),表皮生長(zhǎng)因子(EGF),轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)
4、因子-1(TGF-1),白介素-1(IL-1)的水平。全部數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析均在SPSS18.0軟件的支持下實(shí)現(xiàn)。
結(jié)果:
?。?)序貫高劑量組、氯米芬組大鼠的原始卵泡數(shù)均高于模型對(duì)照組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。序貫高劑量組、補(bǔ)腎填精方高劑量組、氯米芬組大鼠的初次級(jí)卵泡數(shù)都明顯高于模型對(duì)照組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型對(duì)照組比較,序貫高劑量組、氯米芬組、補(bǔ)腎填精方高劑量組成熟卵泡數(shù)、黃體數(shù)明顯升高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
(
5、2)模型對(duì)照組的大鼠 TNF-ɑ,EGF,TGF-1,IL-1水平均高于空白對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。序貫高劑量組、補(bǔ)腎填精方高劑量組、氯米芬組、均能使排卵障礙大鼠 TNF-α水平降低,與模型對(duì)照組比較,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。序貫高劑量組大鼠TNF-α水平顯著低于補(bǔ)腎填精方低劑量組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,低于補(bǔ)腎填精方高劑量組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。序貫高劑量組與氯米芬組比較,差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。序貫高劑量組、氯米芬組、補(bǔ)腎填精方高劑量組均能降低排
6、卵障礙大鼠 EGF水平,與模型對(duì)照組比較,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。序貫高劑量組大鼠EGF水平低于序貫低劑量組,差別顯著,其與補(bǔ)腎填精方高劑量組比較,差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但有下降趨勢(shì)。補(bǔ)腎填精高劑量組大鼠 EGF水平低于補(bǔ)腎填精低劑量組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型對(duì)照組比較,序貫高劑量組、氯米芬組均能顯著降低不孕大鼠TGF-β1水平,補(bǔ)腎高劑量組與模型對(duì)照組相比,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。序貫高劑量組、氯米芬組、補(bǔ)腎高劑量組均能顯著降低不孕大鼠 IL-1β
7、水平,與模型對(duì)照組比較,有顯著差別,序貫高劑量組大鼠IL-1β水平與補(bǔ)腎填精方高劑量組、序貫低劑量組比較,顯著降低,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:補(bǔ)腎促排卵系列方可以改善病理狀態(tài)下的卵巢的形態(tài)結(jié)構(gòu),促進(jìn)各級(jí)卵泡的發(fā)育及排卵。細(xì)胞因子 TNF-ɑ、EGF、 TGF-1、IL-1的異常升高參與了排卵障礙的發(fā)病機(jī)制。補(bǔ)腎促排卵系列方促排卵機(jī)理是降低雄激素致排卵障礙大鼠血清中過(guò)高的TNF-ɑ,EGF,TGF-1,IL-1水平,促進(jìn)卵泡的發(fā)
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