大腸桿菌對兔實(shí)質(zhì)器官氧化損傷指標(biāo)及脾臟中CD14分布的影響.pdf

1、大腸桿菌病是由一定血清型的致病性大腸桿菌及其毒素引發(fā)的一種腸道傳染病。該病一年四季都能發(fā)生，感染各個年齡段的兔子，但主要對斷乳至4月齡仔兔的威脅最大。為進(jìn)一步探討大腸桿菌對病兔實(shí)質(zhì)器官的影響，本實(shí)驗(yàn)以人工感染的大腸桿菌仔兔為實(shí)驗(yàn)對象，通過對患病仔兔實(shí)質(zhì)器官氧化損傷指標(biāo)的檢測及免疫組化法(ICH)檢測不同發(fā)病時期病兔脾臟中CD14的分布情況，從一個新的角度研究致病性大腸桿菌對機(jī)體的病理損傷情況，為進(jìn)一步防治大腸桿菌病提供新的臨床依據(jù)。

2、r>　　本實(shí)驗(yàn)將32只30～40日齡的新西蘭兔平均分為對照組與發(fā)病組兩組，發(fā)病組人工腹腔注射大腸桿菌原液，對照組腹腔注射等量生理鹽水，分別采取兩組第1、3、5、7d仔兔各實(shí)質(zhì)器官（心、肝、脾、肺、腎）1 cm3液氮速凍，保存于-80℃冰箱備用，用于檢測各實(shí)質(zhì)器官氧化損傷指標(biāo)。分別測定各器官的SOD活性，MDA及蛋白含量，分析比較發(fā)病組與對照組各指標(biāo)變化以及發(fā)病組不同發(fā)病時期各指標(biāo)的變化規(guī)律。另取1cm3脾臟，用生理鹽水將實(shí)質(zhì)器官表面沖干

3、凈后固定于40 g/L多聚甲醛中，制作石蠟切片，用于免疫組化法檢測仔兔脾臟中CD14的分布情況，統(tǒng)計仔兔脾臟的血管，白髓，紅髓，小梁CD14的陽性率，分析比較發(fā)病組與對照組CD14分布情況以及發(fā)病組不同發(fā)病時期陽性率的變化規(guī)律。
　　病理解剖結(jié)果:病兔腹腔內(nèi)存在大量纖維蛋白，有明顯的臭味，腸壁外附著有大量的纖維蛋白，結(jié)腸壁有出血現(xiàn)象，腸內(nèi)糞便呈膠凍狀，肝臟和肺臟有明顯的充血、出血現(xiàn)象，脾臟外附著有大量纖維蛋白，個別病兔腎臟出現(xiàn)充血

4、現(xiàn)象。
　　氧化損傷指標(biāo)結(jié)果:發(fā)病兔實(shí)質(zhì)器官SOD活性比對照組低，并且發(fā)病組隨病情發(fā)展呈先降低后升高的趨勢。肝臟在第一天SOD活性達(dá)到最低，心臟和脾臟在第三天達(dá)到最低，肺臟和腎臟在第五天達(dá)到最低。其中心臟在第三天與對照組存在極顯著差異(P＜0.01)，肝臟在第一天與對照組相比存在顯著差異(P＜0.05)，脾臟在第三天與對照組存在顯著差異(P＜0.05)，肺臟和腎臟在第五天與對照組相比存在顯著差異(P＜0.05);蛋白含量發(fā)病組比對

5、照組升高，發(fā)病組隨病情發(fā)展呈先升高后降低趨勢，其中心臟在第三天與對照組存在顯著差異(P＜0.05)，肝臟在第一天與對照組存在顯著差異(P＜0.05)，腎臟在第五天與對照組存在顯著差異(P＜0.05);MDA值比對照組升高，發(fā)病組隨病情發(fā)展呈先升高后降低的趨勢。肝臟在第一天達(dá)到最高，心臟和脾臟在第三天達(dá)到最高，肺臟和腎臟在第五天達(dá)到最高。其中心臟和脾臟在第三天與對照組存在顯著差異(P＜0.05)，肺臟在第五天與對照組存在顯著差異(P＜0.

6、05)，變化趨勢與臨床表現(xiàn)相吻合。
　　免疫組化結(jié)果:所采取的對照組脾臟有4組CD14檢測為陰性，其余12組均出現(xiàn)陽性;發(fā)病兔的脾臟中均檢測為陽性，并且陽性結(jié)果非常明顯，其中血管周圍分布最多，小梁及白髓分布較多，紅髓中分布較少。對脾臟中各部位CD14的陽性表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析顯示，發(fā)病組較對照組表達(dá)量升高，并隨著病情發(fā)展，陽性表達(dá)率先升高后降低，在第三天和第五天的表達(dá)較高。其中白髓中的表達(dá)量在第三天比對照組顯著增加(P＜0.05);紅

7、髓在第五天比對照組顯著增加（P＜0.05），第三天與對照組相比存在極顯著差異(P＜0.01);血管和小梁在第一天、第三天和第五天與對照組相比存在極顯著差異(P＜0.01)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，健康仔兔人工感染大腸桿菌后，各實(shí)質(zhì)器官的氧化損傷指標(biāo)均受到影響，并且不同器官的最高氧化損傷程度發(fā)生在不同發(fā)病時期。肝臟在第一天、心臟和脾臟在第三天、肺臟和腎臟在第五天的氧化損傷最高。免疫組化結(jié)果表明，仔兔在發(fā)病期脾臟中CD14敏感性增強(qiáng)，并在