大腸桿菌感染對(duì)仔兔小腸氧化還原狀態(tài)及TLR4-NF-κB信號(hào)通路的影響.pdf

1、大腸桿菌引起的仔兔腹瀉是嚴(yán)重威脅仔兔健康的重要傳染性疾病之一，一旦爆發(fā)便會(huì)造成重大傷亡，就會(huì)給養(yǎng)殖者造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重制約養(yǎng)兔業(yè)的發(fā)展水平。近些年對(duì)仔兔大腸桿菌病的研究越來越透徹，但在發(fā)病時(shí)機(jī)體在通過TLR4/NF-κB啟動(dòng)天然免疫程序并促進(jìn)獲得性免疫反應(yīng)的發(fā)生過程中，TLR4、NF-κB的表達(dá)分布情況以及仔兔在發(fā)病階段腸道內(nèi)氧化還原系統(tǒng)的變化情況卻鮮有報(bào)道，而了解仔兔在發(fā)生大腸桿菌病時(shí)腸道TLR4/NF-κB信號(hào)通路的表達(dá)以及氧

2、自由基表達(dá)情況，對(duì)于全面了解仔兔大腸桿菌病的發(fā)生機(jī)制具有重要作用和意義。為探討仔兔感染大腸桿菌后腸道內(nèi)Toll樣受體4(TLR4)及NF-κB的表達(dá)以及氧化還原狀態(tài)的變化，將32只30-40日齡健康新西蘭仔兔隨機(jī)分為2組，分別為大腸桿菌感染組和正常對(duì)照組。仔兔在預(yù)飼七天，飲食，排便正常的情況下，人工攻毒大腸桿菌，正常對(duì)照組腹腔注射2mL無菌生理鹽水，大腸桿菌感染組腹腔注射大腸桿菌培養(yǎng)液2mL，成功造模后于攻毒后的1、3、5、7d采集腸道

3、組織，免疫組化法檢測(cè)腸道內(nèi)TLR4、NF-κB表達(dá)以及分光光度法測(cè)定腸道黏膜中總蛋白、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。
　　結(jié)果顯示與正常對(duì)照組相比，在感染后1d，大腸桿菌感染可顯著降低空腸SOD活性(P＜0.05)，有降低十二指腸和回腸SOD活性的趨勢(shì);在感染后3d，感染可顯著降低十二指腸SOD活性(P＜0.05)，有升高空腸SOD活性的趨勢(shì);感染后5d，大腸桿菌感染可顯著降低十二指腸和空腸SOD活性（P＜0.05）

4、，有降低回腸SOD活性的趨勢(shì);感染后7d，大腸桿菌感染可顯著降低回腸SOD活性(P＜0.05)，有降低十二指腸和空腸SOD活性的趨勢(shì)。
　　與正常對(duì)照組相比，感染后第1d，大腸桿菌感染可顯著提高十二指腸和空腸的MDA含量(P＜0.05);感染后第3d，大腸桿菌感染可顯著提高十二指腸MDA含量(P＜0.05)，有提高空腸和回腸MDA含量的趨勢(shì);感染后第5d，大腸桿菌感染可顯著提高各段腸管MDA含量(P＜0.05);感染后第7d，對(duì)各

5、段腸管MDA含量均無顯著變化（P＞0.05）。
　　免疫組化法檢測(cè)十二指腸和空腸內(nèi)的TLR4的表達(dá)，結(jié)果顯示在仔兔感染大腸桿菌后的第3、7d，感染組TLR4陽性率顯著高于正常組(P＜0.05)，第5d大腸桿菌感染組TLR4陽性率極顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.01);免疫組化法檢測(cè)十二指腸和空腸NF-κd3的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)仔兔感染大腸桿菌后的第3d，感染組NF-κB陽性率顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，第5d感染組NF-κd3陽