短期高脂飲食誘導(dǎo)小鼠腸道TLR4-NF-κB通路表達(dá).pdf

1、目的：觀察短期高脂飲食誘導(dǎo)后小鼠腸道 TLR4/NF-κB信號通路的表達(dá)與變化，探討該信號通路與高脂所致的腸道局部炎癥反應(yīng)之間的關(guān)系。
　　方法：60只C57BL/6小鼠隨機(jī)分為高脂飲食實(shí)驗(yàn)組0、1、3、5、7、9天，6個時間組(每組10只)。通過HE染色法，鏡下觀察腸道組織的病理學(xué)變化；免疫組織化學(xué)法檢測炎癥因子TNF-α、IL-6的表達(dá)；蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)測定Toll樣受體4(TLR4)、核因子(NF

2、-κB)和NF-κB p65磷酸化蛋白(PIκB)的表達(dá)量；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法測定TLR4、NF-κB mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：HE染色發(fā)現(xiàn)第0-5天小鼠腸道均未見明顯病理學(xué)改變，第7、9天可見少量巨噬細(xì)胞散在分布；免疫組織化學(xué)法結(jié)果顯示，除第0天時間組外，余各組內(nèi)均有 TNF-α、IL-6表達(dá)，其數(shù)量隨時間呈遞增趨勢與實(shí)驗(yàn)前期TLR4/NF-κB的活化趨勢基本一致；Western-blot、RT-PCR示，

3、第1-7天TLR4/NF-κB的表達(dá)呈時間遞增趨勢且表達(dá)量于第7天時達(dá)峰值(P＜0.05)，隨后表達(dá)量減少；各時間組內(nèi)均有PIκB蛋白表達(dá)，呈遞減趨勢，第9天時與基線比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：短期高脂飲食喂養(yǎng)即可引起小鼠腸道局部炎癥反應(yīng)，炎癥形成初始出現(xiàn)TLR4/NF-κB信號通路的活化，且活化程度與高脂飲食具有一定的時間一致性。TLR4/NF-κB信號通路的激活在高脂飲食誘導(dǎo)的腸道局部炎癥形成中起重要作用，可能為其始動因子。