射頻對豚鼠皮膚膠原生物效應的實驗研究.pdf

1、研究背景：
　　 隨著年齡的增長，皮膚松弛、輪廓的改變和皺紋的形成給很多人帶米困擾，如何預防和延緩皮膚老化己經(jīng)成為人們關注的熱點之一。在近來的幾年里，皮膚美容有一種發(fā)展趨勢，即微創(chuàng)、無創(chuàng)操作技術。人們尋求各種治療手段使皮膚真皮層更新，組織結構更優(yōu)，表皮恢復正常[1]。射頻緊膚是近年來發(fā)展起來的一種無創(chuàng)、非剝脫性的醫(yī)療美容技術。射頻是一種高頻交流變化的電磁波，其通“選擇性電熱作用”[2]發(fā)揮其生物學效應。Richard等報道射頻技

2、術具有祛皺、改善皮膚松弛和老化、改善膚質(zhì)等效果[3]，劉麗紅等[4.5]對射頻技術已進行了較為全面的闡述。雖然該技術已廣泛用于臨床，但有關射頻作用機制的研究則很少報道，機理仍然不十分清楚，限制了射頻技術的進一步發(fā)展及運用。本實驗旨在動態(tài)觀察射頻技術對豚鼠皮膚組織形態(tài)及膠原含量的影響，進一步探討射頻的作用機制。
　　 研究目的：
　　 本課題用射頻作用豚鼠背部皮膚后，通過HE染色觀察皮膚絹織學的改變：用維多麗亞藍麗春紅S雙

3、重染色觀察皮膚膠原纖維的改變；透射電鏡觀察皮膚組織顯微結構；定量分析豚鼠皮膚羥脯氨酸的含量，觀察皮膚膠原的變化，進一步研究射頻緊膚的作用機制。
　　 研究方法：
　　 選擇40只豚鼠，隨機將背部皮膚一側設為射頻區(qū)，另一側設為非射頻區(qū)（空白對照區(qū)），射頻區(qū)采用單極射頻作用豚鼠背部皮膚，功率為60W，累計能量為10KJ，每周1次共5次，對照區(qū)不進行射頻等任何處理。分別于射頻后即刻、1月，2月和3月后切取皮膚樣本，大小約8mm

4、x5mmx3mm。
　　 1.行HE染色、維多Ⅲ業(yè)藍麗春紅S雙重染色在光學顯微鏡下分別觀察四組皮膚組織形態(tài)學改變，特別是膠原纖維的變化，并與非射頻區(qū)相比較。
　　 2．取1mmx3-4mm的新鮮標本，制成透射電鏡標本，在透射電鏡下觀察膠原纖維及成纖維細胞的超微結構變化，并與非射頻區(qū)相比較。
　　 3.采用樣品堿水解法定量檢測各組射頻區(qū)與非射頻區(qū)皮膚中羥脯氨酸的含量，用重復洲量多元方差分析進行統(tǒng)計學處理。
　

5、　 結果：
　　 1.光鏡卜觀察，與對照區(qū)比較，射頻電流作用后各組豚鼠表皮厚度均術見明顯改變；毛細血管組織與毛囊結構完整無損傷，部分見內(nèi)皮細胞腫脹。除此之外，射頻即刻可見真皮層膠原排列疏松、輕微紊亂，少部分卷曲、凝聚成團：射頻后1月顯示真皮層膠原排列較規(guī)則；射頻后2月、3月可見真皮層膠原染色不斷加深，膠原纖維排列整齊、緊湊，結構致密，明顯強于對照區(qū)，并可見彈性纖維和成纖維細胞增多。
　　 2.透射電鏡觀察電鏡下觀察，各

6、組非射頻區(qū)和射頻區(qū)均可見成纖維細胞核膜、胞膜結構完整。即刻組射頻區(qū)與非射頻區(qū)比較膠原纖維輕微紊亂，成纖維細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張明顯，部分線粒體結構模糊；與非射頻區(qū)相比，射頻區(qū)1月至3月膠原纖維排列逐漸致密，成纖維細胞逐漸增多，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴張，線粒體結構逐漸清晰并腫脹減輕。
　　 3．羥脯氨酸含量測定，即刻組射頻區(qū)與非射頻區(qū)比較羥脯氨酸含量無明顯差別。射頻區(qū)皮膚羥脯氨酸含量從1月起至3月持續(xù)高于非射頻區(qū)，具有顯著性差異(p＜0.001)。