他卡西醇對體外培養(yǎng)人黑素細胞生物學性狀的影響.pdf

1、一、研究背景與目的 白癜風是皮膚科常見的一種獲得性色素脫失性皮膚病，發(fā)病率約為0.5～1％，其發(fā)病率無性別差異。確切的發(fā)病機制目前仍不清楚，可能與遺傳、神經(jīng)、精神、自身免疫等多種因素有關。目前的治療手段主要包括：外用補骨脂素類藥物、糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)劑，自體表皮移植，局部光療或光化學療法：窄譜中波紫外線、準分子激光及準分子光，中醫(yī)中藥等，但目前白癜風的治療尚無特效療法，個體對不同療法的療效差異很大，往往療程較長且易出現(xiàn)不良反應

2、。 近年來臨床上嘗試使用他卡西醇[1，24(OH)2D3；商品名萌爾夫，上海百潤]局部外用治療白癜風，取得了一定療效。他卡西醇是活性維生素D3衍生物，文獻報道活性維生素D3對角質(zhì)形成細胞具有增殖抑制、誘導分化的作用，最初應用于治療銀屑病。1998年Glaser等報道兩例銀屑病患者在采用局部外用卡(鈣)泊三醇(維生素D3衍生物)聯(lián)合光療后出現(xiàn)色素沉著現(xiàn)象。隨后國內(nèi)外的臨床醫(yī)生嘗試將其單獨局部外用或聯(lián)合光療、激素等治療白癜風，均取得

3、了很好的臨床療效。但也有研究報道鈣泊三醇聯(lián)合UVB不能提高白癜風復色。由于該療法應用于治療白癜風的時間尚短，目前關于活性維生素D3衍生物治療引起白癜風皮損區(qū)復色的機制研究較少。Ranson等報道1α-25，二羥維生素D3可以提高酪氨酸酶活性，Watabe等1α-25，二羥維生素D3誘導小鼠前黑素細胞的分化與刺激內(nèi)皮素B受體的表達，而國內(nèi)徐前喜等報道1α，25-二羥維生素D3和UVB能促進黑素細胞增殖及黑素合成。關于他卡西醇治療白癜風的作

4、用機制國內(nèi)外研究較少，國外Katayama等報道聯(lián)合應用他卡西醇和日照可以引起體外培養(yǎng)黑素細胞的c-Kit mRNA表達上調(diào)，目前國內(nèi)尚未見實驗室研究方面的報道。 我們推測，他卡西醇治療白癜風有可能是通過直接或間接作用于黑素細胞促進復色，但目前尚未有實驗研究證實，為了初步研究他卡西醇治療白癜風的作用機制，我們觀察了他卡西醇對體外培養(yǎng)人黑素細胞生物學性狀的影響。 二、方法與結(jié)果 1.體外黑素細胞培養(yǎng)，給予不同濃度他

5、卡西醇處理，采用MTT法測定細胞增殖，堿裂解法測定黑素合成，多巴氧化法檢測酪氨酸酶活性。結(jié)果：10-8 mol/L他卡西醇能刺激黑素細胞增殖，10-8和10-9mol/L能促進黑素合成，10-9～10-6 mol/L的他卡西醇能顯著增強正常人黑素細胞酪氨酸酶活性。 2.運用半定量RT-PCR法檢測TYR、TRP-1 mRNA的表達。結(jié)果：10-9～10-6mol/L的他卡西醇能顯著上調(diào)TYR、TRP-1 mRNA的表達。