丙型病毒性肝炎母嬰傳播機(jī)制研究——HCV持續(xù)感染對(duì)體外培養(yǎng)人合體滋養(yǎng)層細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響及其機(jī)理研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)研究了丙型肝炎病毒(HCV)持續(xù)感染對(duì)體外培養(yǎng)人合體滋養(yǎng)層細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響及其機(jī)理。主要內(nèi)容如下： 一、HCV持續(xù)感染對(duì)體外培養(yǎng)人胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響。人晚期囊胚著床后，滋養(yǎng)層內(nèi)層分裂生長(zhǎng)的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞迅速分化為合體滋養(yǎng)層細(xì)胞。合體滋養(yǎng)層細(xì)胞對(duì)受精卵的著床以及母體/胎兒交互式血液循環(huán)的建立均有重要意義，其可侵入母體子宮蛻膜及子宮螺旋動(dòng)脈，是胎盤形成的主要功能細(xì)胞。合體滋養(yǎng)層細(xì)胞是人體正常細(xì)胞中唯一具有侵

2、襲能力的細(xì)胞，類似于腫瘤細(xì)胞。合體滋養(yǎng)層細(xì)胞也具有活躍的合成物質(zhì)的能力，其合成分泌的人絨毛膜促性腺激素(HCG)、人胎盤生乳素(HPL)等對(duì)妊娠的維持以及胎兒的發(fā)育均有十分重要的意義。因此，本實(shí)驗(yàn)分別采用Matrigel人工重建基底膜侵襲實(shí)驗(yàn)來(lái)研究HCV感染對(duì)體外培養(yǎng)人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲能力的影響，并研究細(xì)胞感染HCV后粘附、移動(dòng)能力以及激素合成分泌能力(以HCG為檢測(cè)因子)的改變。研究證實(shí)HCV持續(xù)感染可抑制體外培養(yǎng)人胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)

3、胞包括侵襲能力和激素合成分泌能力在內(nèi)的多種生物學(xué)功能。 二、HCV持續(xù)感染對(duì)體外培養(yǎng)人胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影響。合體滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲能力是其侵入母體子宮蛻膜及子宮螺旋動(dòng)脈，參與形成胎盤(胎盤屏障)的生物學(xué)基礎(chǔ)。研究表明，合體滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲能力與金屬蛋白酶-2(Matrixmetalloproteinase-2，MMP-2)和金屬蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinase-9，MMP

4、-9)密切相關(guān)，合體滋養(yǎng)層細(xì)胞合成分泌MMP-2和MMP-9，降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)，穿越ECM間隙，從而完成侵襲過(guò)程。在前一部分實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，本部分實(shí)驗(yàn)通過(guò)ELISA、明膠酶譜分析以及RT-PCR等方法研究HCV持續(xù)感染對(duì)合體滋養(yǎng)層細(xì)胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影響，探討HCV感染抑制合體滋養(yǎng)層細(xì)咆侵襲能力的具體分子機(jī)制。研究結(jié)果表明HCV持續(xù)感染時(shí)體外培養(yǎng)人胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞MMP-2和MMP-9合成(與侵襲、粘附、運(yùn)動(dòng)能力