馬鈴薯組織培養(yǎng)及試管薯誘導(dǎo)體系優(yōu)化.pdf

1、馬鈴薯是世界第四大糧食作物,在我國糧食、蔬菜、飼料和加工原料生產(chǎn)上占有重要地位，同時由于其產(chǎn)量高，營養(yǎng)豐富，適應(yīng)性強而分布極廣。但是在馬鈴薯的連年種植過程中，病毒病一直是馬鈴薯生產(chǎn)發(fā)展的一大障礙,其不僅影響了馬鈴薯品種退化、產(chǎn)量下降,更重要的是影響了馬鈴薯的品質(zhì)。傳統(tǒng)的育種方式已經(jīng)不能滿足馬鈴薯生產(chǎn)的需要,所以利用基因工程技術(shù)結(jié)合傳統(tǒng)的育種技術(shù)進行馬鈴薯新品種的培育是當前馬鈴薯生產(chǎn)最需解決的問題。
　　本試驗系統(tǒng)地研究了馬鈴薯組織

2、培養(yǎng)和試管薯的誘導(dǎo)，建立了馬鈴薯川薯27號的組織培養(yǎng)快繁體系和試管薯誘導(dǎo)體系，并對農(nóng)桿菌介導(dǎo)的馬鈴薯試管薯抗病毒基因轉(zhuǎn)化體系進行了初步研究。為今后的研究工作提供材料和試驗基礎(chǔ)，為試管薯形成機理的研究提供了科學(xué)依據(jù)和借鑒。試驗結(jié)果表明：
　　1、添加一定量的外源激素對馬鈴薯試管苗的增殖有促進作用。單因子激素對馬鈴薯試管苗增殖促進作用順序為ZT>6-BA>2,4-D>IAA>KT>GA,以ZT濃度1.0mg.L-1最佳。
　　多

3、因子激素組合以1.0 mg.L-12，4-D+2.0 mg.L-1IAA+4.0 mg.L-16-BA+2.0 mg.L-1ZT+2.0 mg.L-1KT效果最好。
　　2、加入一定量的外源細胞分裂素，利于試管薯的形成和產(chǎn)量的提高；其中以培養(yǎng)基MS+10％白糖+5 mg.L-1 KT的誘導(dǎo)率最高，達100%，且試管薯質(zhì)量最好。
　　不同取材部位對馬鈴薯試管薯誘導(dǎo)的效果不同，基部較好。可能是由于頂端優(yōu)勢的原因，含試管苗頂端部位

4、的頸段沒有試管薯的形成。
　　3、以川薯27號的試管薯為供體材料，初步建立了一種農(nóng)桿菌介導(dǎo)的簡單、快速的遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)。在含有75mg.L-1卡那霉素的選擇培養(yǎng)基上，2-3周可產(chǎn)生抗性芽，4-5周獲得完整的轉(zhuǎn)基因植株。初步篩選出了試管薯遺傳轉(zhuǎn)化的優(yōu)化條件，特別是在再生培養(yǎng)基中加入2mg.L-1玉米素，轉(zhuǎn)化率達42.8%。
　　4、單因子激素對馬鈴薯試管苗生根壯苗的促進作用順序為NAA> IAA>IBA,以NAA濃度1.5 mg