紫心馬鈴薯“黑美人”品種的組織培養(yǎng).pdf

1、以紫心馬鈴薯“黑美人”品種薯塊催芽得到的頂芽及帶腋芽的莖段為外植體建立無性系。無性系的建立主要包括外植體的滅菌和芽的萌發(fā)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、試管薯的誘導(dǎo)培養(yǎng)四個階段。主要試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1、外植體的滅菌及芽的誘導(dǎo)。
　　 “黑美人”馬鈴薯經(jīng)催芽后得到芽分為頂芽、第二節(jié)位芽、第三節(jié)位芽三個部位，用0.1％升汞溶液滅菌，頂芽滅菌5分鐘，接種于MS+頭孢噻肟鈉500mg/L+鏈霉素10mg/L培養(yǎng)基，滅菌效果最好，30

2、天后污染率僅為16.67％.成活率達(dá)51.52％；第二節(jié)帶腋芽的莖段滅菌處理6分鐘，接種于MS+頭孢噻肟鈉500mg/L+鏈霉素10mg/L的培養(yǎng)基，30天后污染率為40.00％，成活率為46.00％；第三節(jié)及其余帶腋芽的莖段滅菌處理8分鐘，接種于MS+慶大霉素80mg/L+卡那霉素500mg/L的培養(yǎng)基，30天后污染率為41.51％，成活率為47.17％。
　　 2、增殖培養(yǎng)
　　 試驗(yàn)研究了添加6-BA、PP333、

3、NAA單因子及雙因子組合的MS培養(yǎng)基對“黑美人”馬鈴薯初代無菌芽繼代增殖的影響。結(jié)果表明增殖壯苗階段MS+6-BA3.0mg/L+PP3330.2 mg/L為最佳培養(yǎng)基，增殖倍數(shù)高達(dá)6.96倍。
　　 3、生根
　　 在MS中添加NAA、IBA、活性炭、香蕉果肉誘導(dǎo)生根，試驗(yàn)結(jié)果表明：NAA對根的誘導(dǎo)效果最明顯，在本試驗(yàn)設(shè)置的NAA0.1～0.6mg/的濃度范圍內(nèi)，MS+NAA0.4mg/L培養(yǎng)基的誘導(dǎo)效果最佳，生根率達(dá)

4、100％。
　　 4、試管薯誘導(dǎo)階段以在MS中添加6-BA、PP333，以及改變MS培養(yǎng)基中大量元素濃度或糖濃度方法誘導(dǎo)試管薯的形成。結(jié)果表明：
　　 (1)在MS添加不同濃度6-BA的各組培養(yǎng)基中，以MS+6-BA1.5mg/L的培養(yǎng)基最適宜誘導(dǎo)試管薯的形成，誘導(dǎo)率達(dá)90％。
　　 (2)改變MS中糖濃度(40、50、60、70、80g/L)，以MS+糖60g/L處理組最適合“黑美人”馬鈴薯試管薯的誘導(dǎo)，結(jié)薯率

5、達(dá)93.33％。
　　 (3)在不同糖濃度和多效唑的雙因子組合試驗(yàn)中，以MS+PP3330.2 mg/L+糖70g/L處理組結(jié)薯率較高，為57.89％，但是與單因子糖處理組相比，添加多效唑的處理組的結(jié)薯率均低于相對應(yīng)的單因子糖處理組。
　　 (4)改變MS培養(yǎng)基中大量元素濃度對“黑美人”馬鈴薯試管薯的誘導(dǎo)有明顯影響。在所試驗(yàn)的1/4MS、2/4MS、3/4MS、MS、2MS的范圍內(nèi)以2MS處理組誘導(dǎo)出的薯塊直徑、平均單薯