西蘭花籽中蘿卜硫苷提取分離工藝研究.pdf

1、蘿卜硫苷是硫代葡萄糖苷的一種，其主要降解產(chǎn)物蘿卜硫素，是迄今為止從蔬菜中發(fā)現(xiàn)的抗癌活力最強(qiáng)的一類異硫代氰酸鹽。蘿卜硫苷在西蘭花籽中含量豐富，達(dá)20～50mg/g。國內(nèi)外都有研究者試圖以蘿卜硫苷提取物為原料，開發(fā)保健食品和藥品。但是，蘿卜硫苷開發(fā)利用的前提之一是獲得大批量的標(biāo)準(zhǔn)提取物。
　　本研究以西蘭花籽為原料，嘗試構(gòu)建蘿卜硫苷的精確測(cè)定方法，優(yōu)化面向批量制備的提取分離工藝，研究結(jié)果如下：
　　1、建立了蘿卜硫苷HPLC檢測(cè)

2、新方法
　　采用GlobalChromatographySP-120-5-C18-AP色譜柱，Waters2487紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長為229nm，以甲醇∶水=1∶9（含0.1%甲酸，pH=4.0）作為流動(dòng)相，流速為1.0mL/min。在該液相色譜條件下，蘿卜硫苷與雜質(zhì)峰的分離度可提高到2.54，加樣回收率達(dá)99.45%。該方法適用于蘿卜硫苷的精確定量。
　　2、優(yōu)化了蘿卜硫苷初提工藝
　　西蘭花籽（含蘿卜硫苷18.6

3、1mg/g）經(jīng)滅酶、破碎、脫脂、干燥預(yù)處理后，以80%的甲醇水為提取溶劑，料液比1∶20（g/mL），在70℃下提取20min，蘿卜硫苷提取率達(dá)92.84%。
　　3、優(yōu)化了蘿卜硫苷初提物分離工藝
　　采用離子交換法對(duì)初提物進(jìn)行分離，發(fā)現(xiàn)D315大孔陰離子樹脂對(duì)蘿卜硫苷具較佳吸附效果，以0.5mol/L氯化鈉水溶液為洗脫劑，當(dāng)上樣量體積為離子交換樹脂重量20倍時(shí)（g/mL），蘿卜硫苷分離工序的提取率可達(dá)89.36%，洗脫液經(jīng)