西蘭花中蘿卜硫苷的提取和純化研究.pdf

1、硫代葡萄糖苷(Gluco sinolates)，簡稱硫苷，其降解產(chǎn)物種類多樣，具備各種生物活性，目前廣受關(guān)注的是抗癌、提高免疫力的活性。蘿卜硫苷(Glucoraphanin)屬于硫代葡萄糖苷的其中一類，其主要降解產(chǎn)物蘿卜硫素(Sulforaphane)是目前蔬菜中抗癌功效最強(qiáng)的物質(zhì)。但蘿卜硫素不穩(wěn)定，易揮發(fā)，通常采用蘿卜硫苷形式制備其產(chǎn)品。從西蘭花中提取蘿卜硫苷時(shí)，其內(nèi)源黑芥子酶會(huì)降解硫苷，因此，需要研究西蘭花中蘿卜硫苷提取時(shí)的滅酶、提

2、取、純化工藝技術(shù)。
　　本文主要以西蘭花為原材料，探究其種子中蘿卜硫苷的最佳提取工藝，新鮮西蘭花的各種滅酶提取蘿卜硫苷工藝，以及西蘭花粗提液中蘿卜硫苷的純化方法。最終得到以下結(jié)論:
　　1、乙醇提取西蘭花種子中蘿卜硫苷的最佳工藝條件為:乙醇濃度為70％、料液比為1∶5、提取溫度為70℃、提取時(shí)間為20 min，提取次數(shù)為2次，最終得到每克西蘭花種子中蘿卜硫苷提取得率為5.41mg。
　　2、比較Sevag法、單寧酸法、

3、飽和氯化鈉法、硅膠法、殼聚糖法對(duì)去除新鮮西蘭花的蘿卜硫苷粗提液中蛋白質(zhì)的影響，及對(duì)蘿卜硫苷提取得率的影響，最后綜合選擇Sevag法。
　　3、通過溫度處理、蒸汽處理、微波處理、NaCl浸泡處理和單寧酸打漿處理研究各處理方法對(duì)新鮮西蘭花中黑芥子酶去酶提取蘿卜硫苷的影響，NaCl浸泡處理最終可得0.20 mg/g蘿卜硫苷。得到一種氯化鈉結(jié)合乙醇常溫處理西蘭花，高得率提取蘿卜硫苷的新方法，且與最優(yōu)方法的得率沒有顯著差異。為工業(yè)化去除新鮮

4、西蘭花中的黑芥子酶提取蘿卜硫苷提供新的思路。
　　4、采用DEAE Sephadex A-25葡聚糖凝膠吸附純化西蘭花種子粗提液中的蘿卜硫苷，經(jīng)HPLC檢測(cè)含量僅為0.01 mg/g。該純化方法效果欠優(yōu)，需耗費(fèi)較多的西蘭花種子且還需經(jīng)過制備型HPLC方可得到較多的純化品。
　　5、使用D201強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂、D290強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂、717型強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂、AB-8大孔樹脂、高分子殼聚糖、硅膠、酸性氧化鋁、硅

5、藻土、還原鐵粉、活性炭粉末對(duì)新鮮西蘭花的蘿卜硫苷粗提液進(jìn)行靜態(tài)吸附，吸附率分別為70.54％、86.04％、71.84％、21.9863％、1.85％、22.99％、32.28％、3.92％、69.39％、99.87％。
　　6、選取吸附效果較差的AB-8大孔樹脂、硅藻土、高分子殼聚糖進(jìn)行雜質(zhì)吸附，吸附液經(jīng)冷凍干燥得到固體粉末的蘿卜硫苷含量比較原液分別提高-18.18％、1.29％和0.18％，該操作對(duì)提高蘿卜硫苷含量基本無作用;

6、對(duì)吸附率效果較好的活性炭粉末、D290強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂和還原鐵粉進(jìn)行靜態(tài)解吸附選擇洗脫液，活性炭粉末和還原鐵粉易吸附蘿卜硫苷，但難找到合適的洗脫液進(jìn)行洗脫;而D290強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂可使用0.5M氯化鈣溶液洗脫，蘿卜硫苷洗脫率可達(dá)39.42％。
　　7、選擇D290強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂為柱填料，0.5M氯化鈣溶液為洗脫液，通過動(dòng)態(tài)吸附和洗脫得到相應(yīng)的動(dòng)態(tài)吸附飽和曲線以及動(dòng)態(tài)解吸附曲線，結(jié)果表明:0.5 gD290強(qiáng)堿性陰離