以富勒烯為載體的pH敏感型阿霉素靶向給藥系統(tǒng)的初步研究.pdf

1、納米材料的研究目前成為生物醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)，納米載體具有高效、穩(wěn)定、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，可透過(guò)細(xì)胞膜和血腦屏障，能更好的向靶組織輸送藥物。構(gòu)建納米給藥載體系統(tǒng)可以降低化療藥物的毒性，并增加其對(duì)靶組織的選擇性以提高抗腫瘤活性。
　　 富勒烯(fullerene，C60)是一種特殊的納米材料，由于其獨(dú)特的物理化學(xué)和生物學(xué)特性，自發(fā)現(xiàn)之日起，就引起了人們的廣泛關(guān)注。但富勒烯難溶于水，這大大限制了其在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用，因此，改善富勒烯的水溶性

2、是進(jìn)行藥物載體深入研究的首要問(wèn)題。C60經(jīng)光激發(fā)后會(huì)產(chǎn)生大量的單線(xiàn)態(tài)氧，對(duì)腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用，可以作為光敏劑在光動(dòng)力治療中應(yīng)用，因此利用C60的光敏特性，通過(guò)激光照射對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行光動(dòng)力治療。腫瘤細(xì)胞由于缺氧和糖酵解增強(qiáng)等原因而使其外環(huán)境中的氫離子增多，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的pH低于正常細(xì)胞。因此，構(gòu)建一種在腫瘤環(huán)境下釋放藥物，正常生理pH條件下穩(wěn)定的藥物載體系統(tǒng)具有現(xiàn)實(shí)的科學(xué)意義。本論文將C60與高效抗腫瘤藥物阿霉素(DOX)通過(guò)

3、腙鍵相連，腙鍵在酸性條件下容易發(fā)生斷裂，使DOX從pH敏感型C60-HBA-DOX納米靶向給藥系統(tǒng)中釋放出來(lái)，發(fā)揮其抑制腫瘤生成的作用。
　　 具體構(gòu)建過(guò)程如下:
　　 首先對(duì)C60進(jìn)行氨基衍生化，得到C60-NH2產(chǎn)物;然后對(duì)羧基苯肼(HBA)通過(guò)碳化二亞胺活化偶合反應(yīng)共價(jià)連接到上述的C60-NH2產(chǎn)物上形成肼鍵修飾的富勒烯(C60-HBA)，最后將DOX與C60-HBA通過(guò)腙鍵連接。使用傅里葉紅外光譜、透射電鏡、紫外

4、全波長(zhǎng)掃描和粒徑分析儀等儀器對(duì)合成的每一步進(jìn)行表征。結(jié)果表明，成功構(gòu)建了C60-HBA-DOX載藥系統(tǒng)，并具有良好的水溶性和粒徑分布。
　　 此外考察了C60-HBA-DOX載藥系統(tǒng)分別在生理和酸性pH條件下，DOX的釋放情況，結(jié)果顯示，在生理pH值(7.4)的條件下，C60-HBA-DOX比較穩(wěn)定，而在pH=5.5時(shí)，DOX從C60-HBA-DOX載藥系統(tǒng)中快速釋放出來(lái)。
　　 體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)中，以黑色素瘤細(xì)胞(B

5、16-F10)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，考察C60-HBA-DOX載藥系統(tǒng)的體外抗腫瘤活性。結(jié)果表明，C60-NH2、C60-HBA在細(xì)胞水平上可以認(rèn)為是無(wú)毒的，可以作為良好的藥物載體。C60-HBA-DOX載藥系統(tǒng)可以被B16-F10細(xì)胞有效的攝取，并對(duì)該細(xì)胞有明顯的生長(zhǎng)抑制作用，且這種抑制作用具有時(shí)間劑量依賴(lài)性;此外加入激光照射的光動(dòng)力治療組(PDT)對(duì)B16-F10細(xì)胞的抑制作用更強(qiáng)。
　　 以上結(jié)果表明，C60-HBA-DOX載藥系統(tǒng)