環(huán)境pH敏感性PEG化糖脂給藥系統(tǒng)抗腫瘤靶向研究.pdf

1、環(huán)境響應性聚合物成為近年來藥劑學領域研究較為熱門的新型靶向藥物遞送載體,其能在一定程度上模擬生物響應行為,隨外部環(huán)境的微小變化而改變自身性能,使藥物更為有效地遞送至靶區(qū),從而提高藥物療效并降低毒副作用。本研究根據(jù)腫瘤部位微環(huán)境特點,構建環(huán)境pH敏感性聚乙二醇化殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束給藥系統(tǒng)。以嫁接物膠束的聚乙二醇修飾,大幅度減少正常細胞對嫁接物膠束的攝取,并延長體內循環(huán)時間,提高嫁接物膠束的腫瘤組織靶向分布;以嫁接物膠束與聚乙二醇之間的

2、pH敏感性橋鏈在腫瘤組織較低pH環(huán)境條件下的斷裂,獲得嫁接物膠束的腫瘤細胞高效攝取,以期實現(xiàn)抗腫瘤藥物的安全高效治療。
　　 本研究以18.0Kda的低分子量殼聚糖為原料,以碳二亞胺為偶合劑,合成殼聚糖-硬脂酸嫁接物(stearicacidgraftedchitosan,CS)。核磁共振氫譜確證嫁接物結構,三硝基苯磺酸法測定其硬脂酸修飾比例為5.9％。CS聚合物在水性介質中能自聚集形成膠束,芘熒光法測定其臨界膠束濃度為129.6

3、μg/mL。由粒徑電位儀測得1.0mg/mL的CS膠束溶液的數(shù)均粒徑為27.6±1.8nm,表面電位為39.7±1.6mV。
　　 以碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺為催化劑,順烏頭酸為pH敏感性橋鏈,在CS嫁接物上鍵合聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG),合成環(huán)境pH敏感性PEG化糖脂嫁接物(pH-sensitivePEGylatedstearicacidgraftedchitosan,PCCS);同時通過席夫

4、反應在CS上直接鍵合PEG合成非環(huán)境pH敏感性PEG化糖脂嫁接物(pH-insensitivePEGylatedstearicacidgraftedchitosan,PCS),作為非pH敏感性嫁接物對照。分別考察PCS和PCCS的理化性質。經(jīng)PEG修飾后,嫁接物的臨界膠束濃度增大,膠束的數(shù)均粒徑增大而表面電位有所降低.體外釋放結果呈現(xiàn)出PCCS具有pH敏感性降解行為,釋放介質的pH越低,PEG的斷鏈越快。細胞定量攝取結果顯示,PEG修飾

5、后膠束在正常肝細胞(BRL-3A)上的攝取顯著降低,而在肝癌細胞(BEL-7402)上,PCCS的細胞攝取隨pH的降低略有增加,顯示其作為抗腫瘤藥物遞送載體的潛在優(yōu)越性。
　　 以阿霉素(doxorubicin,DOX)為模型藥物,超聲-透析法制各CS,PCS,PCCS載藥膠束(CS/DOX,PCS/DOX,PCCS/DOX)。三種膠束的載藥能力相當,包封率都在86%以上。粒徑測定結果顯示載藥膠束的數(shù)均粒徑均較各自的空白膠束有所

6、減小。體外釋放結果顯示,PEG修飾減緩了載藥膠束的藥物釋放,且PCCS/DOX具有pn觸發(fā)的藥物釋放行為,釋放介質的pH越低,藥物的釋放越快。以BEL-7402為腫瘤細胞模型,體外考察載藥膠束的細胞毒性及攝取情況,結果表明PCCS/DOX的細胞攝取能力和細胞藥效均優(yōu)于PCS/DOX。
　　 動物活體組織分布結果顯示,PCCS攜帶示蹤染料在腫瘤組織有大量聚集。動物體內藥效結果顯示,PCCS/DOX給藥系統(tǒng)在維持藥效的同時,能夠提高