淫羊霍苷抗骨質(zhì)疏松分子機(jī)理研究.pdf

1、原發(fā)性骨質(zhì)疏松是一種以骨量減少、骨顯微結(jié)構(gòu)退化為特征，致使骨的脆性增加以及易于發(fā)生骨折的全身性骨骼疾病。目前，骨質(zhì)疏松癥的治療主要采用激素替代療法、降鈣素、雙磷酸鹽、氟化物等，雖然有一定療效但副作用明顯。中草藥治療骨質(zhì)疏松的歷史悠久，具有見效快、無毒副作用和費(fèi)用低廉等優(yōu)點(diǎn)。淫羊藿(Herba Epimedii)系小檗科(Berberidacae)淫羊藿屬(Epimedium)植物，具有補(bǔ)腎壯陽、強(qiáng)筋健骨、祛風(fēng)除濕之功效，是中醫(yī)治療骨質(zhì)疏

2、松方劑中應(yīng)用頻率最高的一味草藥。淫羊藿苷是淫羊藿中含量最為豐富的黃酮苷類化合物，其抗骨質(zhì)疏松活性已有較多報(bào)道，但其活性形式和確切的作用機(jī)理目前尚不清楚。我們?yōu)榇嗽O(shè)計(jì)并開展了一系列實(shí)驗(yàn)研究，主要包括：1．對(duì)比淫羊藿苷和其主要代謝產(chǎn)物-淫羊藿次苷Ⅱ?qū)撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞成骨性分化的影響，比較二者藥理活性的高低，確定正確的給藥途徑。2．采用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞做為干預(yù)對(duì)象，研究淫羊藿次苷Ⅱ在促進(jìn)其成骨性分化過程中對(duì)雌激素信號(hào)通路的影響，探討雌激素信號(hào)

3、通路與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨性分化過程的聯(lián)系。3．建立大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)，研究淫羊藿次苷Ⅱ在促進(jìn)其成骨性分化過程中對(duì)NO-cGMP-PKG信號(hào)通路的影響，探討淫羊藿次苷Ⅱ、NO-cGMP-PKG信號(hào)通路、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨性分化過程此三者之間的關(guān)系。
　　 所得結(jié)論如下：
　　 1．淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ均可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞得成骨性分化，但淫羊藿次苷Ⅱ的活性明顯高于淫羊藿苷，具體表現(xiàn)在明顯提高ALP活性，

4、增加CFU-FALP、骨鈣素分泌量、鈣鹽沉積量及鈣化結(jié)節(jié)數(shù)量，并可強(qiáng)烈促進(jìn)成骨性分化因子bFGF、IGF-1和轉(zhuǎn)錄因子Osterix(OSX)和Runx-2的基因表達(dá)。
　　 2．ICSⅡ可顯著增強(qiáng)堿性磷酸酶(ALP)活性，促進(jìn)骨鈣素、Ⅰ型膠原蛋白的分泌和鈣鹽沉積，與成骨性分化相關(guān)的因子OSX和Runx-2的基因表達(dá)量也顯著升高，但這些效應(yīng)均可被雌激素通路的特異性阻斷劑ICI182.780所抑制。
　　 3．ICSⅡ可顯

5、著促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨性分化，但促進(jìn)效應(yīng)均可被NO-cGMP-PKG通路的特異性阻斷劑(L-NAME、ODQ、PDE5)所抑制，表明ICSⅡ是通過激活NO-cGMP-PKG通路來促進(jìn)成骨性分化的。
　　 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，淫羊藿苷經(jīng)口服后，體內(nèi)的主要代謝產(chǎn)物-淫羊藿次苷Ⅱ具有較強(qiáng)的促骨形成活性，證明了口服給藥的合理性。對(duì)作用機(jī)理的研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿次苷Ⅱ在促進(jìn)成骨性分化的過程中同時(shí)激活了雌激素信號(hào)通路和NO-cGMP-P