江蘇省流感流行現(xiàn)況及抗流感藥物研究.pdf

1、目的：流行性感冒(Influenza，簡(jiǎn)稱流感)是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病。根據(jù)病毒核蛋白、基質(zhì)蛋白抗原性不同將流感分為甲、乙、丙三種類型，其中甲型流感病毒又可分為多種亞型。由于自身抗原變異，流感病毒曾引起數(shù)次世界范圍大流行。流感每次大流行均嚴(yán)重威脅人類的健康，給社會(huì)穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來(lái)災(zāi)難性打擊。中國(guó)是流感高發(fā)國(guó)家，自2000年開(kāi)始，我國(guó)衛(wèi)生部與世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）合作開(kāi)展流

2、感監(jiān)測(cè)項(xiàng)目，建立了覆蓋全國(guó)31個(gè)省、以流感樣病例報(bào)告和病毒分離為主的流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)，目的是及時(shí)掌握我國(guó)流感疫情動(dòng)態(tài)，及時(shí)預(yù)警預(yù)測(cè)，以便采取有效措施，減少疾病導(dǎo)致的死亡。防治流感的方法主要有疫苗研制和抗病毒治療。由于流感病毒變異性強(qiáng)，對(duì)某些流感病毒有效的疫苗對(duì)其他型別的流感病毒無(wú)效，影響疫苗的預(yù)防控制效果，因而流感的控制還需要依靠有效的抗病毒藥物。目前臨床上批準(zhǔn)用于預(yù)防和治療的經(jīng)典抗流感藥物主要有M2離子通道抑制劑和神經(jīng)氨酸酶抑制劑兩大類。

3、神經(jīng)氨酸酶抑制劑代表性藥物有奧司他韋（達(dá)菲），能選擇性地抑制流感病毒的神經(jīng)氨酸酶（neuraminidase，NA），阻止流感病毒的擴(kuò)散，緩解流感癥狀。但長(zhǎng)期使用抗病毒藥物易產(chǎn)生耐藥性，增加不良反應(yīng)的發(fā)生率，導(dǎo)致療效降低。前期研究發(fā)現(xiàn)，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)具有修復(fù)病原體感染所致肺損傷的功能，可能對(duì)流感病毒所造成的呼吸系統(tǒng)損傷具有治療作用，但尚缺乏實(shí)驗(yàn)證據(jù)?；谏鲜霰尘?，我們開(kāi)展了系列研究，首先利用流感監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，分析江蘇省流感流行

4、現(xiàn)況，評(píng)價(jià)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室和哨點(diǎn)醫(yī)院流感監(jiān)測(cè)效果;然后采用Meta分析法，系統(tǒng)評(píng)價(jià)常用抗流感藥物奧司他韋的有效性和安全性;繼而采用實(shí)驗(yàn)法，探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞改善重癥流感癥狀的可行性，研究結(jié)果將為流感疾病預(yù)防、治療及預(yù)測(cè)預(yù)后提供客觀依據(jù)。
　　方法：⑴基于“中國(guó)流感監(jiān)測(cè)信息系統(tǒng)”中江蘇省2011-2014年流感樣病例（influenza like illness，ILI）監(jiān)測(cè)資料、病毒學(xué)監(jiān)測(cè)資料、流感暴發(fā)報(bào)告及人感染禽流感監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，描述

5、我省流感的流行病學(xué)特征及變化趨勢(shì)，對(duì)哨點(diǎn)醫(yī)院送檢的標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測(cè)和病毒分離。⑵以“oseltamivir”AND“influenza”AND“effect”為檢索式檢索PubMed;以“磷酸奧司他韋”or“達(dá)菲”and“療效”and“流感”為檢索式檢索萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)、中國(guó)知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫(kù)，并根據(jù)檢索出文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)進(jìn)行補(bǔ)充檢索，文獻(xiàn)檢索時(shí)限截止至2015年3月。從文獻(xiàn)中提取一般信息、研究對(duì)象人口學(xué)特征信息、質(zhì)量評(píng)估及結(jié)局測(cè)量指標(biāo)（發(fā)熱持續(xù)時(shí)間、

6、癥狀持續(xù)時(shí)間、并發(fā)癥、不良反應(yīng)、住院情況、抗菌藥物使用、肺炎發(fā)生情況等）。通過(guò)對(duì)文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)和Meta分析，系統(tǒng)評(píng)價(jià)奧司他韋治療流感的有效性和安全性。⑶選擇SPF級(jí)C57BL/6雌性小鼠共80只，隨機(jī)分為四組，每組20只。對(duì)小鼠注入流感病毒造模后以MSCs移植治療處理，觀察其呼吸功能、肺組織結(jié)構(gòu)變化。體外培養(yǎng)小鼠MSCs隨機(jī)分為4組，分別加入轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β和/或纖維化抑制因子Dickkopf-1，并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)

7、、免疫印跡法、Real time-PCR等檢測(cè)技術(shù)Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)小鼠MSCs分化的影響。
　　結(jié)果：①2011～2014年全省流感哨點(diǎn)醫(yī)院共報(bào)告ILI845798例，同期門診就診總數(shù)2191萬(wàn)人次，ILI就診百分比3.86％。2013～2014年度ILI就診構(gòu)成比最高，達(dá)4.01％。3年來(lái)共計(jì)檢測(cè)流感監(jiān)測(cè)樣本57954份，其中核酸陽(yáng)性標(biāo)本4912份，陽(yáng)性率8.48％。病毒核酸類型分布以A型中的H3型、B型、A

8、型中的H1型為主，分別占39.60％、34.08％、25.86％。三年來(lái)共報(bào)告流感和流感樣病例暴發(fā)疫情13起。②Meta分析顯示，使用奧司他韋能夠有效縮短流感患者的發(fā)熱以及癥狀持續(xù)時(shí)間，還能減少住院、中耳炎和非特異性并發(fā)癥的發(fā)生率和抗生素的使用率。未發(fā)現(xiàn)使用奧司他韋治療流感能增加不良反應(yīng)的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。③MSCs移植的流感小鼠肺損傷程度顯著低于對(duì)照組小鼠。加入Dickkopf-1后，Wnt信號(hào)通路蛋白β-Catenin、TCF、GSK-3β

9、、Axin1、JNK的表達(dá)有所降低，成纖維細(xì)胞表面相關(guān)蛋白Vimentin、α-SMA、β-Catenin、TCF、GSK-3β的表達(dá)水平減低或恢復(fù)正常。
　　結(jié)論：近年來(lái)江蘇省流感流行呈現(xiàn)甲乙型交替的規(guī)律，局部暴發(fā)時(shí)有發(fā)生。及時(shí)使用奧司他韋治療能夠有效縮短患者的發(fā)熱以及癥狀持續(xù)時(shí)間，且不會(huì)顯著增加不良反應(yīng)的發(fā)生率。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)用于重癥流感早期治療具有潛在價(jià)值，可抑制機(jī)體過(guò)度免疫應(yīng)答，減輕肺損傷，改善肺功能，該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以