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文檔簡介
1、【背景及目的】術(shù)中定位膽管、避免其損傷是每個(gè)外科醫(yī)生都必須面對的問題。但是在許多情況下,如手術(shù)區(qū)炎癥或粘連較重時(shí),術(shù)中準(zhǔn)確定位膽管往往很困難。今年來術(shù)中X線膽管造影被用于臨床,但它仍具有很多不足之處。因此需要探索一種安全、快捷、高分辨率的成像方法,可以提供術(shù)中實(shí)時(shí)的膽管影像,幫助醫(yī)生定位膽管、避免損傷。本實(shí)驗(yàn)旨在探索吲哚菁綠近紅外熒光成像的特點(diǎn)、機(jī)制及其用于術(shù)中實(shí)時(shí)膽道造影的可行性和其臨床應(yīng)用價(jià)值。
【方法】吲哚菁綠分別加入雙
2、蒸水、10%胎牛血清、和膽汁中,再加上單純血清和膽汁和蒸餾水共6組溶液分別用紫外-可見光光度儀檢測吸收光譜,再將前三組用熒光分光光度儀檢測發(fā)射光譜;臨床上收集患者膽汁,用BCA法測定不同膽汁樣本蛋白濃度;將膽汁進(jìn)行凝膠蛋白電泳后考馬斯亮藍(lán)法染色,以明確膽汁中蛋白質(zhì)的存在及條帶分布情況;經(jīng)大鼠靜脈注射ICG溶液后,動態(tài)觀察并記錄肝外膽管、膽管周圍組織、下腔靜脈及門靜脈的變化并進(jìn)行熒光強(qiáng)度定量測定,繪制熒光強(qiáng)度變化曲線和信噪比(SBR)變化
3、曲線;構(gòu)建術(shù)中大鼠膽管急性狹窄和膽管急性損傷模型以模擬臨床術(shù)中膽管損傷的情景,分別給予兩組大鼠靜脈注射ICG后觀察其用于診斷術(shù)中膽管損傷的效果。
【結(jié)果】經(jīng)檢測ICG在血清中的吸收光譜區(qū)間為600~900nm,最高吸收峰在800nm左右,發(fā)射光譜區(qū)間為780~900nm,發(fā)射峰值在830nm波長附近;ICG在膽汁中的吸收光譜區(qū)間為600~900nm,最高吸收峰在805nm,發(fā)射光譜區(qū)間為780~900nm,發(fā)射峰在840nm;
4、ICG在蒸餾水中的吸收光譜區(qū)間為600~900nm,吸收峰在770nm波長附近,無明顯發(fā)射區(qū)間及峰值。2組膽汁樣本檢測蛋白濃度分別為5.2mg/ml和7.9mg/ml,蛋白電泳及考染結(jié)果顯示6條主要蛋白條帶,分子量在15KDa、30KDa、40KDa、55KDa、100KDa、170KDa左右;動態(tài)膽管熒光成像及定量檢測的結(jié)果顯示靜脈注射ICG2min后肝外膽管開始顯影并熒光逐漸增強(qiáng),8min熒光強(qiáng)度及SBR達(dá)峰值,后熒光強(qiáng)度逐漸減弱至
5、50min時(shí)停止觀察;5~35min內(nèi),SBR>2時(shí),肝外膽管可以清晰的顯影并能與門靜脈、膽管周圍組織有很好的分辨;急性膽管狹窄與損傷模型的熒光成像結(jié)果顯示術(shù)中吲哚菁綠膽管成像能清楚顯示膽管狹窄及損傷部位,有利于術(shù)中及時(shí)診斷及治療。
【結(jié)論】1、吲哚菁綠的生物學(xué)和光學(xué)特性適合用于膽管熒光成像;2、吲哚菁綠可能是通過與膽汁中蛋白質(zhì)結(jié)合而具有發(fā)射近紅外熒光特性;3、ICG注射后2min膽管即可顯影,在5-35min可提供穩(wěn)定清晰的
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