基于花菁骨架近紅外熒光探針的設(shè)計及成像應(yīng)用.pdf

1、作為一種原位可視化觀測技術(shù)的熒光成像在小分子檢測方面得到了廣泛應(yīng)用，其中有機小分子近紅外熒光探針具有背景干擾低、光穿透性強、檢測靈敏度高、對生物體損傷小等優(yōu)點，表現(xiàn)出非常好的應(yīng)用前景。本論文的工作主要基于基于花菁近紅外熒光探針分別實現(xiàn)了對含巰基氨基酸(GSH、Cys和 Hcy)、肼、超氧自由基陰離子的定量檢測。主要工作如下：
　　(1)檢測細胞內(nèi)GSH近紅外熒光探針技術(shù)是一個理解疾病機制的有效手段，本文第二章描述了設(shè)計合成花菁近紅

2、外熒光探針CyDNS，基于生物巰基特異性斷裂O-S鍵，繼而發(fā)生分子內(nèi)1,6-消除，釋放出熒光團，熒光得以恢復(fù)。并且我們將探針成功用于細胞、活體及各種組織器官的成像。
　　此處為圖片
　　(2)合成了一個髙選擇性、高靈敏度檢測Cys的近紅外熒光探針CyA，該探針具有裸眼可視顏色變化，大的紫外吸收波長變化，熒光增強的性質(zhì)，在HEPES緩沖溶液中或在稀釋的血清中都表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。該探針在Cys存在下發(fā)生共軛加成并環(huán)化消除，具有較

3、低的檢測限(熒光：0.16μM，紫外：0.13μM)，最終低毒性的探針成功用于細胞成像。
　　此處為圖片
　　(3)在前面工作的基礎(chǔ)上，我們設(shè)計合成了基于乙?；鳛樽R別基團的近紅外熒光探針CyJ，利用肼的親核性實現(xiàn)熒光的增強變化。探針不僅容易合成，而且表現(xiàn)出非常好的識別性質(zhì)，探針對肼具有高度選擇性，較低的檢測限(5.4 ppb)和快速檢測肼，同時探針對肼蒸氣的檢測也有非常高的靈敏度。我們也將探針用于細胞、小鼠及其組織的成像。

4、
　　此處為圖片
　　(4)合成設(shè)計了新型的近紅外熒光探針(CyR)，其結(jié)構(gòu)包括作為熒光團的變形花菁骨架和作為超氧自由基陰離子O2·-識別基團的二苯基次磷?；?。利用O2·-的親核性對次磷?；M攻并消除，熒光團的熒光得以恢復(fù)。探針具有高選擇性、高靈敏度、低檢測限(9.9 nM)和快速響應(yīng)(10 min)的能力，此外，探針細胞滲透性好，可以在細胞內(nèi)穩(wěn)定存在并具有非常低的細胞毒性。這些性質(zhì)使得探針很好的運用于斑馬魚和小鼠的活體成像