鐵皮石斛與美花石斛莖尖生長(zhǎng)機(jī)理及其多糖累積規(guī)律研究.pdf

1、中藥石斛(Caulis Dendrobii)為來(lái)源于蘭科石斛屬多種植物,長(zhǎng)期以來(lái)供需矛盾較為突出。石斛的來(lái)源植物生長(zhǎng)緩慢,尤以細(xì)莖類的石斛如鐵皮石斛(Dendrobium candidum Wall Ex Lindl)、美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)等為甚;由于其生長(zhǎng)緩慢、產(chǎn)量低,導(dǎo)致野生資源日漸稀少、人工栽培效益低而推廣困難。進(jìn)行石斛的生長(zhǎng)機(jī)理研究、促生長(zhǎng)技術(shù)研究和藥材質(zhì)量形成研究是解決上述問(wèn)題的根

2、本途徑。
　　課題首先進(jìn)行了本草考證,闡述了石斛藥材的藥用歷史,明確了古今藥名的一致性;品種考證探討了古今對(duì)應(yīng)的石斛品種;闡述了石斛功效的歷史沿革;考證了本草記載并結(jié)合現(xiàn)代文獻(xiàn)明確了石斛的道地產(chǎn)區(qū)的多樣性。課題對(duì)石斛道地產(chǎn)區(qū)之一的廣西進(jìn)行了石斛資源和生境調(diào)查。
　　通過(guò)鐵皮石斛、美花石斛莖尖細(xì)胞分裂節(jié)律研究,首次發(fā)現(xiàn)其晝夜均可進(jìn)行細(xì)胞分裂,并發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞分裂高峰期;其莖尖細(xì)胞分裂指數(shù)極低,是導(dǎo)致石斛生長(zhǎng)緩慢的主要原因。

3、　　實(shí)驗(yàn)對(duì)不同實(shí)驗(yàn)組(噴施6-芐基氨基嘌呤(6-BA);特殊光照處理;對(duì)照組)鐵皮石斛、美花石斛莖尖分生組織分區(qū)研究。結(jié)果揭示了石斛莖尖分生組織細(xì)胞的分層和分區(qū)情況;探討了人工干預(yù)措施(噴施6-BA;特殊光照處理)對(duì)其的影響。
　　進(jìn)行鐵皮石斛和美花石斛莖尖細(xì)胞死亡性質(zhì)的研究。通過(guò)顯微、超微的細(xì)胞形態(tài)觀察,末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的生物素化的 dUTP切口末端標(biāo)記(TUNEL法)以及吖啶橙熒光法研究發(fā)現(xiàn),其莖尖細(xì)胞死亡性質(zhì)屬于細(xì)胞

4、壞死。認(rèn)為T(mén)UNEL法較適用于石斛莖尖細(xì)胞死亡性質(zhì)的研究。
　　進(jìn)行了鐵皮石斛和美花石斛莖尖細(xì)胞 ATP酶的顯微定位研究。實(shí)驗(yàn)明確了ATP酶活性顯著的部位,揭示了不同階段、不同實(shí)驗(yàn)處理的莖尖細(xì)胞 ATP酶的活性差異。
　　進(jìn)行了鐵皮石斛和美花石斛的抗逆性研究。通過(guò)測(cè)定不同時(shí)期、不同實(shí)驗(yàn)處理的石斛過(guò)氧化物酶(POD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)的含量,研究其抗逆性及人工干預(yù)措施對(duì)其抗逆性的影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn) PO

5、D、CAT活性,鐵皮石斛和美花石斛均以對(duì)照組為最低;MDA則以對(duì)照組為最高。鐵皮石斛激素組、物理組的POD、CAT活性,以及對(duì)照組CAT活性,均以5月最高,10月最低。美花石斛激素組、物理組的POD活性無(wú)月份差異,對(duì)照組則由5月、10、次年1月遞增。
　　首次研究了不同時(shí)期、不同實(shí)驗(yàn)處理的鐵皮石斛與美花石斛葉片蔗糖合成酶活性,探討石斛生長(zhǎng)過(guò)程的生理變化以及人工干預(yù)措施對(duì)其的影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)5月份的蔗糖合成酶活性,兩種石斛均為對(duì)照組高