PI-9在胃癌表達(dá)的意義及與GrB表達(dá)關(guān)系的初步研究.pdf

1、研究背景和目的:細(xì)胞免疫在機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答中發(fā)揮主要作用,其效應(yīng)細(xì)胞主要為活化的細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(Cytotoxic Tlymphocytes,CTL)和自然殺傷細(xì)胞(Nature killer cell,NK),它們可通過(guò)穿孔素(perforin,PFP)／顆粒酶B(granzymeB,GrB)介導(dǎo)的細(xì)胞毒途徑和Fas／Fas-L介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑發(fā)揮作用,其中PFP／GrB介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用是主要途徑。GrB是CTL和NK細(xì)胞中含量

2、最豐富、發(fā)揮細(xì)胞毒作用最快且有效的顆粒酶,是主要的效應(yīng)分子,能快速誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn),CTL和NK細(xì)胞間不會(huì)因釋放GrB而相互攻擊,其因?yàn)樵谟贑TL和NK細(xì)胞自身可表達(dá)一種GrB蛋白酶特異抑制劑,即絲氨酸蛋白酶抑制劑-9(serine proteinaseinhibitor9,PI-9),防止被自身的顆粒酶或相互之間釋放的顆粒酶攻擊,而形成自我保護(hù),即內(nèi)源性免疫逃逸機(jī)制。
　　 我們先前的研究發(fā)現(xiàn),GrB在胃良惡性

3、上皮細(xì)胞有表達(dá)[1],由此我們推測(cè)胃良惡性上皮細(xì)胞是否類似于CTL和NK細(xì)胞,亦有PI-9表達(dá)而具有內(nèi)源性免疫逃逸機(jī)制,形成一種自我保護(hù)能力,逃避了細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞的免疫殺傷作用,從而有利于腫瘤的發(fā)生、發(fā)展?
　　 本研究旨在探討胃良惡性細(xì)胞是否亦具有細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞類似的主動(dòng)免疫逃逸分子機(jī)制,從而成為免疫豁免細(xì)胞。其意義在于揭示腫瘤細(xì)胞是否具有內(nèi)在的主動(dòng)免疫逃逸這一全新機(jī)制提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究?jī)?nèi)容分為兩部分:在第一部分,觀察

4、PI-9在良惡性胃上皮細(xì)胞是否有表達(dá),其表達(dá)變化規(guī)律并探討其臨床生物學(xué)意義。在第二部分,主要觀察GrB在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)及其與PI-9表達(dá)的相互關(guān)系。旨在揭示胃癌細(xì)胞是否與細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞一樣,也存在PI-9與GrB組成式共表達(dá)關(guān)系。
　　 方法:選取術(shù)前未進(jìn)行放療、化療及免疫治療,經(jīng)外科行胃癌根治性或姑息性切除術(shù)后患者標(biāo)本35例,收集其相應(yīng)完整的臨床及病理學(xué)資料。采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)切緣上皮、癌旁上皮、癌細(xì)胞及相應(yīng)淋巴結(jié)

5、轉(zhuǎn)移胃癌細(xì)胞中PI-9表達(dá)情況和GrB在胃癌細(xì)胞中的表達(dá),主要探討其在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用并分析其與臨床病理因素之間的關(guān)系與預(yù)后價(jià)值。
　　 結(jié)果:第一部分:1.PI-9在切緣上皮、癌旁上皮、癌細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)有PI-9表達(dá),陽(yáng)性率分別是80.00％、65.71％、42.86％,切緣上皮、癌旁上皮與癌細(xì)胞之間有差異(P<0.05),切緣與癌旁上皮細(xì)胞之間無(wú)顯著差異(P>0.05)；2.胃癌細(xì)胞中PI-9的表達(dá)與患者臨床分期及淋巴結(jié)

6、轉(zhuǎn)移兩組之間差異顯著(P<0.05),與年齡、性別、組織分化及浸潤(rùn)深度無(wú)差異(P>0.05)；3.在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌細(xì)胞中有PI-9表達(dá),陽(yáng)性表達(dá)率為47.83％,相應(yīng)的原發(fā)癌中PI-9表達(dá)率為26.07％,兩者之間無(wú)差異(P>0.05)。第二部分:1.在胃癌上皮細(xì)胞中有GrB表達(dá),陽(yáng)性率是48.57％。2.35例標(biāo)本中顯示在胃癌上皮細(xì)胞中PI-9和GrB有陽(yáng)性表達(dá),PI9+&GrB+表達(dá)的胃癌占25.71％,PI9-&GrB-表達(dá)占34

7、.29％,同步率60.00％；PI9+&GrB-表達(dá)的胃癌占17.14％,PI9-&GrB+占22.86％,非同步率40.00％,其中PI9-&GrB-在胃癌上皮細(xì)胞中的表達(dá)與PI9+&GrB-。差異顯著(P<0.05)。3.PI9+&GrB+、PI9-&GrB-、PI9+&GrB-及PI9-&GrB+在浸潤(rùn)深度及淋巴轉(zhuǎn)移差異顯著(P<0.05)；進(jìn)一步兩兩比較發(fā)現(xiàn):PI9+&GrB+與PI9+&GrB-在浸潤(rùn)程度淺組差異顯著(P<0.

8、05)；在浸潤(rùn)程度淺、臨床分期早組PI9+&GrB+與PI9-&GrB+有顯著差異(P<0.05)；PI9-&GrB-與PI9+&GrB-在浸潤(rùn)程度深、臨床分期晚及有淋巴轉(zhuǎn)移組差異顯著(P<0.05)。
　　 結(jié)論:1.本研究顯示在人體切緣、癌旁、胃癌上皮細(xì)胞及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有PI-9表達(dá),初步證實(shí)我們的推測(cè)。PI-9對(duì)胃癌生物學(xué)行為的影響尚需更進(jìn)一步的研究。2.GrB在胃癌中確有表達(dá)與PI-9表達(dá)有一定同步性,但未