乙烯二氨基三嗪-N-異丙基丙烯酰胺共聚物轉(zhuǎn)基因載體.pdf

1、本工作制備了乙烯二氨基三嗪/N-異丙基丙烯酰胺共聚物(PVDT-co-PNIPAAm)，并研究了其與DNA形成氫鍵復(fù)合物的性質(zhì)及該復(fù)合物介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染。通過無規(guī)自由基聚合反應(yīng)制備PVDT-co-PNIPAAm共聚物，并精制出水溶性部分，傅立葉變換紅外光譜證實了共聚物的生成。GPC顯示所合成的PVDT-co-PNIPAAm共聚物的分子量比較小。由260納米紫外吸光度的測定確定了共聚物的摩爾共聚比，并定量了任意未知濃度聚合物水溶液的濃度。制備了

2、不同比例的PVDT-co-PNIPAAm載體/pDNA復(fù)合物，瓊脂糖凝膠電泳證實該共聚物能有效縮合DNA，且電泳條帶呈現(xiàn)典型氫鍵特征。透射電鏡(TEM)下發(fā)現(xiàn)，復(fù)合物形態(tài)依賴于載體/DNA的復(fù)合比，呈現(xiàn)球狀或大尺寸聚集物，類似于陽離子載體縮合DNA的形態(tài)。體外細胞轉(zhuǎn)染實驗揭示，基于氫鍵結(jié)合DNA的PVDT-co-PNIPAAm共聚物載體可成功地將pGL3質(zhì)粒轉(zhuǎn)入COS-1細胞中，總體上轉(zhuǎn)染效率比裸DNA高30～66倍，與商業(yè)化非病毒載體