基于聚乙烯二氨基三嗪的氫鍵型轉基因載體.pdf

1、本文研制出一種新型的通過氫鍵作用于DNA堿基對以達到復合DNA目的非病毒載體。以自由基無規(guī)聚合的方式制備了聚乙烯二氨基三嗪(PVDT)及其與乙烯基吡咯烷酮(VP)的共聚物，并精制出水溶部分。瓊脂糖凝膠電泳顯示PVDT基聚合物可有效復合DNA，并通過氫鍵作用使DNA縮合成密實狀態(tài)，有效置換溴化乙錠(EB)。隨著DNA的復合，圓二色譜(CD)發(fā)現(xiàn)DNA構象由B型向C型轉變，并出現(xiàn)psi型譜線，可能緣于DNA高級結構的改變(長程手性結構)。透

2、射電鏡(TEM)下，被PVDT基聚合物縮合的DNA呈現(xiàn)球狀、環(huán)狀或大的聚集體，類似于陽離子載體縮合DNA的形態(tài)。以熒光素酶和增強的綠色熒光蛋白報告基因研究PVDT基載體對非洲猴。腎(COS-1)細胞的轉染，結果表明PVDT基載體具有滿意的轉染效率，比商品化ExGen 500有著更高的轉染活性和更低的細胞毒性。PVDT基載體可有效保護DNA免受DNase I的酶解，復合物在牛血清蛋白(BSA)下仍具有高的穩(wěn)定性。鑒于這些特點，PVDT基載