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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:評(píng)估用聚乙烯亞胺修飾后納米羥基磷灰石基因載體的分散穩(wěn)定性能和轉(zhuǎn)染率,為提高納米羥基磷灰石基因載體分散穩(wěn)定性能和轉(zhuǎn)染率奠定理論基礎(chǔ)。
方法:向HA納米顆粒膠體液中加入一定濃度的聚乙烯亞胺溶液,透射電鏡下觀察聚乙烯亞胺修飾后羥基磷灰石納米顆粒的形貌及粒徑;用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)分析修飾后的HA納米顆粒攜帶、保護(hù)DNA的能力,及nHAP-PEI/DNA解離的方式,Zeta電位儀測(cè)定nHAP-PEI和HA在酸、堿、中性
2、環(huán)境中的電位, MTT比色法檢測(cè)nHAP-PEI(10KD)對(duì)HepG2細(xì)胞的毒性,選用增強(qiáng)型綠色熒光蛋白質(zhì)粒pEGFP-N1與nHA-PEI結(jié)合后,分別轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞HepG2、Hela、SW620,計(jì)算其轉(zhuǎn)染率。
結(jié)果:nHAP-PEI(10KD)分散程度好,粒徑60-80nm,在PH7.2時(shí),Zeta電位42.87mV,修飾后的HA納米顆粒負(fù)載量較未經(jīng)修飾的HA高,且有攜帶、保護(hù)DNA的能力。結(jié)合到HAP-PEI納米顆粒上
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