羥基磷灰石納米顆粒介導(dǎo)的體外轉(zhuǎn)染及其保存方式的研究.pdf

1、目的：研究羥基磷灰石納米顆粒結(jié)合DNA，體外轉(zhuǎn)染細(xì)胞的能力。并分析作為基因載體的羥基磷灰石納米顆粒膠體液的保存方式。 方法：向羥基磷灰石納米顆粒膠體液中加入一定濃度的CaCl2溶液，以提供二價陽離子Ca2+，修飾羥基磷灰石納米顆粒；測定修飾后的羥基磷灰石納米顆粒在不同pH值條件下的Zeta電位；用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計分析修飾后的羥基磷灰石納米顆粒攜帶、保護DNA的能力，及與結(jié)合的DNA解離的方式；通過熒光顯微鏡的觀察，

2、計算羥基磷灰石納米顆粒攜帶pEGFP-N3質(zhì)粒，體外轉(zhuǎn)染Bel7402細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率。將不同溫度環(huán)境(-20℃、4℃及室溫)保存下的羥基磷灰石用Ca2+修飾，通過瓊脂糖凝膠電泳、熒光顯微鏡，測定不同保存條件下的羥基磷灰石攜帶DNA的能力，體外轉(zhuǎn)染Bel7402細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率。 結(jié)果：經(jīng)過Ca2+修飾的羥基磷灰石納米顆粒在酸性、堿性環(huán)境下Zeta電位均為正值，并可有效結(jié)合DNA；結(jié)合到羥基磷灰石納米顆粒上的DNA可以用磷酸緩沖液洗脫下