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文檔簡(jiǎn)介
1、放線菌是一類具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣泛應(yīng)用前途的微生物。本課題從各地采集的214個(gè)土樣中,分離得到1156株放線菌,以此為基礎(chǔ)建立了放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物庫(kù)。并構(gòu)建了α-淀粉酶/糖苷酶抑制劑高通量篩選模型。利用此模型從放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物庫(kù)中篩選得到了高產(chǎn)α-淀粉酶/糖苷酶抑制劑的放線菌菌株37株,其中包含5株α-糖苷酶抑制劑產(chǎn)生菌,5株α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)生菌,27株為α-淀粉酶/糖苷酶混合型抑制劑產(chǎn)生菌。
利用形態(tài)觀察、培養(yǎng)特征、
2、生理生化鑒定以及16S rRNA序列分析,對(duì)5株α-糖苷酶抑制劑產(chǎn)生菌中的PWH852進(jìn)行了分類鑒定。結(jié)果表明,PWH852菌株為鏈霉菌屬中的微紅鏈霉菌。
通過(guò)單因素考察、正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)等方法,本課題對(duì)α-糖苷酶抑制劑產(chǎn)生菌PWH852菌株的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,使PWH852菌株分泌α-糖苷酶抑制劑產(chǎn)量達(dá)到50mg/L,比初始培養(yǎng)條件下的產(chǎn)量提高了1倍。此外,本課題建立了利用三級(jí)膜系統(tǒng)、陰陽(yáng)離子交換樹(shù)脂吸附、真空凍干三步分離法
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