牛磺熊脫氧膽酸緩解TNF-a誘發(fā)3T3-L1細(xì)胞脂肪分解及其機(jī)制.pdf

1、目的：探討牛黃熊脫氧膽酸（TUDCA)對(duì)TNF-a誘發(fā)3T3-L1細(xì)胞脂肪分解的影響及其可能機(jī)制。
　　方法：以3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化成3T3-L1脂肪細(xì)胞；將TNF-a以不同濃度和不同時(shí)間作用3T3-L1脂肪細(xì)胞后，觀察TNF-a對(duì)細(xì)胞生存率的影響，以確定TNF-a適宜的作用濃度和時(shí)間；通過測(cè)定培養(yǎng)基中甘油含量和觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴的形態(tài)變化評(píng)價(jià)TUDCA對(duì)TNF-a誘發(fā)脂肪分解的影響；同時(shí)用Western Blotting檢

2、測(cè)脂解關(guān)鍵調(diào)節(jié)者圍脂滴蛋白Perilipin A蛋白和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志蛋白Bip、IRE、JNK、p-IRE、p-JNK的表達(dá),進(jìn)一步明確其具體信號(hào)機(jī)制。
　　結(jié)果：TNF-a（50ng/ml）孵育3T3-L1脂肪細(xì)胞24h后，甘油釋放量明顯增高(x_±s，3.89±0.24)，脂滴彌碎，而TUDCA（1mmol/L）預(yù)處理3h后甘油釋放量減少(x_±s，2.41±0.17)（P<0.01)，同時(shí)脂滴彌碎度明顯減弱。此外，TUDCA

3、可緩解TNF-a誘發(fā)的Perilipin A蛋白表達(dá)下調(diào)。TNF-a（50ng/ml）呈時(shí)間依賴性激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志蛋白Bip、p-IRE、p-JNK的表達(dá)，而TUDCA（1mmol/L）預(yù)處理3h后這三種蛋白表達(dá)水平明顯降低（P<0.01)。
　　結(jié)論：①TNF-a可以誘發(fā)3T3-L1細(xì)胞脂肪分解，增加游離脂肪酸（FFA）的釋放，引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，調(diào)控Perilipin A蛋白表達(dá)。②TUDCA可緩解TNF-a誘發(fā)的脂肪分解，其機(jī)