瓜果中植物生長調(diào)節(jié)劑殘留量的檢測方法研究.pdf

1、植物生長調(diào)節(jié)劑（Plant Growth Regulator，PGR）是一類人工合成的、具有與天然植物激素同等效能甚至更為有效、更為優(yōu)越效能的活性物質(zhì)，屬于農(nóng)藥范疇。隨著農(nóng)業(yè)的發(fā)展和科學(xué)技術(shù)的進步，運用植物生長調(diào)節(jié)劑對農(nóng)作物的生長發(fā)育和產(chǎn)量進行化學(xué)調(diào)控已逐漸成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不可缺少的重要措施。與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)相比，植物生長調(diào)節(jié)劑可以實現(xiàn)作物生長的“人為”調(diào)控。目前，生產(chǎn)上廣泛使用的類別有生長素類、細胞分裂素類和赤霉素類等，常用的有10多種。瓜果

2、中常用的植物生長調(diào)節(jié)劑有11種，其中屬于生長素類的有吲哚-3-乙酸、吲哚-3-丁酸、α-萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸、對氯苯氧乙酸和對氟苯氧乙酸6種，屬于細胞分裂素類的有異戊烯腺嘌呤、氯吡脲和6-芐氨基嘌呤，屬于赤霉素類的是赤霉素，多效唑是植物生長延緩劑。
　　但近年來發(fā)現(xiàn)，植物生長調(diào)節(jié)劑在農(nóng)作物中的殘留通過食物鏈進入人體后一定程度上會造成危害，輕者造成腹瀉等疾病，重者使人體免疫力下降，骨骼疏松，甚至致畸、致癌、致突變等嚴(yán)重后果。

3、在國內(nèi)外對于植物生長調(diào)節(jié)劑殘留量的檢測報道中，最多僅檢測了其中8種植物生長調(diào)節(jié)劑，覆蓋面并不廣。
　　本課題主要關(guān)注瓜果中多種植物生長調(diào)節(jié)劑殘留量的檢測方法研究。在前處理方法方面，優(yōu)化樣品的提取和凈化步驟；在分析方法方面，采用5 mmol/L乙酸銨水溶液（含1‰甲酸）-乙腈作為流動相進行梯度洗脫，以Agilent XDB-C18色譜柱（4.6 mm×50 mm，1.8μm）色譜柱進行分離，并結(jié)合高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀（HPLC

4、-MS/MS）進行精確定性定量研究。
　　第二章建立了以混合型陽離子交換固相萃取柱（MCX）對樣品進行凈化的前處理方法，使用HPLC-MS/MS同時分析瓜果中多效唑、氯吡脲、異戊烯腺嘌呤和6-芐氨基嘌呤4種堿性植物生長調(diào)節(jié)劑的殘留量。采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液外標(biāo)法定量，4種植物生長調(diào)節(jié)劑在各自范圍內(nèi)線性很好（多效唑：0.5～100μg/kg，氯吡脲：0.05～10μg/kg，異戊烯腺嘌呤：0.02～2μg/kg，6-芐氨基嘌呤：0.2

5、～20μg/kg），相關(guān)系數(shù)均大于0.9994。定量限（S/N＞10）在0.03～0.28μg/kg之間，檢出限（S/N＞3）在0.01～0.08μg/kg之間。于生梨、蘋果、香蕉和橙中進行三水平添加回收試驗（多效唑：5～25μg/kg，氯吡脲：0.5～2.5μg/kg，異戊烯腺嘌呤：0.2～1.0μg/kg，6-芐氨基嘌呤：2～10μg/kg），檢測結(jié)果顯示，4種植物生長調(diào)節(jié)劑的加標(biāo)回收率分別在81.5％～94.2%、82.5%～92

6、.7%、79.0%～100.0%和83.3%～100.3%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.5%～9.3%、2.7%～9.9%、2.6%～9.6%和3.5%～9.5%之間。
　　第三章建立了以混合型陰離子交換固相萃取柱（MAX）對樣品進行凈化的前處理方法，使用HPLC-MS/MS同時分析瓜果中2,4-二氯苯氧乙酸、赤霉素、吲哚-3-丁酸、α-萘乙酸、對氟苯氧乙酸、對氯苯氧乙酸和吲哚-3-乙酸7種酸性植物生長調(diào)節(jié)劑的殘留量。采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶

7、液外標(biāo)法定量，7種植物生長調(diào)節(jié)劑在各自范圍內(nèi)線性很好（2,4-二氯苯氧乙酸：1～200μg/kg，赤霉素：0.5～250μg/kg，吲哚-3-丁酸：2～200μg/kg，α-萘乙酸：20～1000μg/kg，對氟苯氧乙酸：5～500μg/kg，對氯苯氧乙酸：10～1000μg/kg，吲哚-3-乙酸：10～500μg/kg），相關(guān)系數(shù)均大于0.9994。定量限（S/N＞10）在0.17～21.88μg/kg之間，檢出限（S/N＞3）在0.

8、05～6.56μg/kg之間。于生梨、蘋果、香蕉和橙中進行三水平添加回收試驗（2,4-二氯苯氧乙酸：10～50μg/kg，赤霉素：5～25μg/kg，吲哚-3-丁酸：20～100μg/kg，α-萘乙酸：100～500μg/kg，對氟苯氧乙酸：50～250μg/kg，對氯苯氧乙酸：100～500μg/kg，吲哚-3-乙酸：50～250μg/kg），檢測結(jié)果顯示，7種植物生長調(diào)節(jié)劑的加標(biāo)回收率分別在80.6%～106.3%、82.2%～10

9、4.3%、82.5%～104.4%和80.3%～102.2%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.0%～9.7%、2.5%～11.6%、3.7%～10.7%和3.0%～9.5%之間。
　　第四章建立了以LC-18固相萃取柱對樣品進行凈化的前處理方法，使用HPLC-MS/MS同時分析瓜果中多效唑、氯吡脲、異戊烯腺嘌呤、6-芐氨基嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、赤霉素、吲哚-3-丁酸、α-萘乙酸、對氟苯氧乙酸、對氯苯氧乙酸和吲哚-3-乙酸11種植物生長

10、調(diào)節(jié)劑的殘留量。采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液外標(biāo)法定量，7種植物生長調(diào)節(jié)劑在各自范圍內(nèi)線性很好（多效唑：0.5～100μg/kg，氯吡脲：0.05～10μg/kg，異戊烯腺嘌呤：0.04～4μg/kg，6-芐氨基嘌呤：0.2～40μg/kg，2,4-二氯苯氧乙酸：1～200μg/kg，赤霉素：0.5～250μg/kg，吲哚-3-丁酸：2～200μg/kg，α-萘乙酸：10～1000μg/kg，對氟苯氧乙酸：5～500μg/kg，對氯苯氧乙酸：1

11、0～1000μg/kg，吲哚-3-乙酸：5～500μg/kg），相關(guān)系數(shù)均大于0.9990。定量限（S/N＞10）在0.04～5.30μg/kg之間，檢出限（S/N＞3）在0.01～1.59μg/kg之間。于生梨、蘋果和橙中進行三水平添加回收試驗（多效唑：5～25μg/kg，氯吡脲：0.5～2.5μg/kg，異戊烯腺嘌呤：0.2～1.0μg/kg，6-芐氨基嘌呤：2.0～10.0μg/kg，2,4-二氯苯氧乙酸：10～50μg/kg，赤

12、霉素：5～25μg/kg，吲哚-3-丁酸：20～100μg/kg，α-萘乙酸：100～500μg/kg，對氟苯氧乙酸：50～250μg/kg，對氯苯氧乙酸：100～500μg/kg，吲哚-3-乙酸：50～250μg/kg），檢測結(jié)果顯示，11種植物生長調(diào)節(jié)劑的回收率范圍分別為81.5%～107.5%、80.0%～111.7%和81.2%～99.9%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為3.0%～9.4%、2.5%～11.6%和3.0%～9.6%。

13、　　第五章建立了以固相分散萃?。≦uEChERS）對樣品進行凈化的前處理方法，使用HPLC-MS/MS同時分析瓜果中多效唑、氯吡脲、異戊烯腺嘌呤、6-芐氨基嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、赤霉素、吲哚-3-丁酸、α-萘乙酸、對氟苯氧乙酸、對氯苯氧乙酸和吲哚-3-乙酸11種植物生長調(diào)節(jié)劑的殘留量。采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液外標(biāo)法定量，11種植物生長調(diào)節(jié)劑在各自范圍內(nèi)線性很好（多效唑：0.5～100μg/kg，氯吡脲：0.1～10μg/kg，異戊烯腺

14、嘌呤：0.04～4μg/kg，6-芐氨基嘌呤：0.4～40μg/kg，2,4-二氯苯氧乙酸：1～200μg/kg，赤霉素：0.5～250μg/kg，吲哚-3-丁酸：2～200μg/kg，α-萘乙酸：10～1000μg/kg，對氟苯氧乙酸：5～500μg/kg，對氯苯氧乙酸：10～1000μg/kg，吲哚-3-乙酸：10～500μg/kg），相關(guān)系數(shù)均大于0.9991。定量限（S/N＞10）在0.06～8.40μg/kg之間，檢出限（S/

15、N＞3）在0.02～2.52μg/kg之間。于梨、黃瓜和檸檬中進行三水平添加回收試驗（多效唑：5～25μg/kg，氯吡脲：0.5～2.5μg/kg，異戊烯腺嘌呤：0.2～1.0μg/kg，6-芐氨基嘌呤：2.0～10.0μg/kg，2,4-二氯苯氧乙酸：10～50μg/kg，赤霉素：5～25μg/kg，吲哚-3-丁酸：20～100μg/kg，α-萘乙酸：100～500μg/kg，對氟苯氧乙酸：50～250μg/kg，對氯苯氧乙酸：100

16、～500μg/kg，吲哚-3-乙酸：50～250μg/kg），檢測結(jié)果顯示，11種植物生長調(diào)節(jié)劑的回收率在93.7%～110.6%、92.5%～105.3%和94.6%～109.8%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.0%～9.7%、2.7%～9.0%和2.2%～9.3%之間。
　　本課題建立了同時測定瓜果中多種植物生長調(diào)節(jié)劑殘留量的四種方法，最多進行11種植物生長調(diào)節(jié)劑殘留的同時檢測，多于文獻報道中最多同時檢測的數(shù)量（8種），且方法靈敏度高