GDF9和BMP15在黑線倉鼠的差異表達.pdf

1、在一些動物中，其生殖活動表現(xiàn)出明顯的季節(jié)性節(jié)律，生殖行為常常在特定的季節(jié)發(fā)生，即季節(jié)性繁殖，黑線倉鼠（Cricetulus barabensis）是典型的季節(jié)性繁殖動物，同時也是我國北方地區(qū)對農(nóng)田作物危害程度極大的物種之一。GDF9和 BMP15是 TGFβ超家族中的重要成員，參與調(diào)控卵泡生長、分化等生理過程，調(diào)控雌性哺乳動物繁殖。本研究運用RT-PCR和FQ-PCR技術(shù)探尋GDF9和BMP15在黑線倉鼠中的表達規(guī)律，探討光周期對黑線倉

2、鼠卵巢功能的影響，為掌握黑線倉鼠的繁殖機制提供理論基礎(chǔ)，同時為哺乳動物繁殖的環(huán)境條件控制及鼠害防治策略的制定提供科學(xué)理論依據(jù)。
　　本研究克隆得到黑線倉鼠GDF9cDNA序列1364bp（KM272986），含完整CDS1329bp；BMP15cDNA序列1253bp（KM369986），含完整CDS1179bp。對GDF9和BMP15序列進行生物信息學(xué)分析，二者在理化性質(zhì)，二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)以及進化聚類等方面顯示出較高的相似度，

3、在進化上均相對保守；對預(yù)測出的氨基酸序列分析，二者均含典型TGFβ結(jié)構(gòu)域和6個Cys，而TGFβ家族大多數(shù)成員多為7個，這提示GDF9與BMP15可能以非共價鍵連接，使之以同源或異源二聚體行使功能。
　　不同發(fā)育階段以及不同組織定量結(jié)果顯示GDF9、BMP15在黑線倉鼠多個組織（肝臟、子宮、腎臟、脾臟、下丘腦、卵巢）中均有表達，卵巢中表達豐度相對較高，說明該基因?qū)诰€倉鼠雌性生殖功能的調(diào)節(jié)可能具有重要作用；GDF9、BMP15不同

4、發(fā)育時期的表達水平也有差異，卵巢中二者的表達都在成體發(fā)情期中最高，下丘腦中都在亞成體中最高，此差異表明GDF9、BMP15的表達都存在發(fā)育階段特異性，且不同發(fā)育階段基因主要作用的靶器官可能不同。
　　GDF9、BMP15在黑線倉鼠卵巢組織中高繁殖季節(jié)的表達水平顯著高于其他季節(jié)（P＜0.05），進一步證明GDF9、BMP15在卵泡發(fā)育中發(fā)揮重要作用。研究不同光周期下黑線倉鼠的體重、臟器系數(shù)、性腺激素含量等變化，表明短光照對黑線倉鼠繁

5、殖有抑制效應(yīng)，長光照在一定程度上有促進效應(yīng)；GDF9、BMP15在不同光周期條件下表達水平的差異響應(yīng)了光周期的變化，短光照組GDF9、BMP15 mRNA水平均顯著高于長光照組（P＜0.05），表明GDF9、BMP15的表達水平可能受到光周期的調(diào)節(jié)，GDF9、BMP15的具體作用機制可能是在短光照誘導(dǎo)的卵巢退化過程中發(fā)揮抗凋亡作用，通過抑制顆粒細胞凋亡促進卵泡存活，從而減少卵泡閉鎖；對短光照處理4周的倉鼠再進行4周長光照（PT組），GD