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文檔簡介
1、目的:通過免疫組化S-P法檢測HIF-1、MGMT、CD133在人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的表達(dá),應(yīng)用RT-PCR法測定HIF-1、MGMT、CD133在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中的mRNA的表達(dá),探討三者在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)相關(guān)性。
方法:收集自2010年12月至2012年12月手術(shù)切除病理證實(shí)的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(WHOⅣ級)33例,同期收集低級別膠質(zhì)瘤25例(WHOⅠ-Ⅱ級)作為對照組,收集腦深部腫瘤皮層造瘺正常腦組織5例,作為陰性對照組
2、。采用免疫組織化學(xué)S-P法檢測HIF-1、MGMT、CD133在人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、低級別膠質(zhì)瘤及正常腦組織中的表達(dá);應(yīng)用RT-PCR法測定HIF-1、MGMT、CD133在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞、低級別膠質(zhì)瘤中的mRNA的表達(dá),統(tǒng)計(jì)軟件選用SPSS13.0,計(jì)量資料采用卡方檢驗(yàn)。相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析采用Spearman等級相關(guān)分析。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn),當(dāng)P<0.05時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:免疫組織化學(xué)S-P法檢測33例膠質(zhì)母細(xì)胞
3、瘤,其中HIF-1陽性表達(dá)32例(96.7%),MGMT陽性表達(dá)23例(69.7%),CD133陽性表達(dá)33例(100%),均陽性表達(dá)23例(69.7%)。對照組25例低級別膠質(zhì)瘤中HIF-1陽性表達(dá)9例(36.0%),MGMT陽性表達(dá)8例(32.0%),CD133陽性表達(dá)8例(32.0%),均陽性表達(dá)4例(16.0%)。在正常腦組織中HIF-1、MGMT、CD133均陰性表達(dá)??梢婋S腫瘤級別升高,HIF-1、MGMT、CD133表達(dá)顯
4、著升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。應(yīng)用RT-PCR法測定HIF-1、MGMT、CD133在低級別膠質(zhì)瘤及膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中mRNA的表達(dá),其中HIF-1mRNA在低級別膠質(zhì)瘤中相對定量0.23±0.05,在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中相對定量0.87±0.12; MGMT mRNA在低級別膠質(zhì)瘤中相對定量0.27±0.07,在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中相對定量0.67±0.09; CD133 mRNA在低級別膠質(zhì)瘤中相對定量0.16±0.05,在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中
5、相對定量0.57±0.08。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)HIF-1與MGMT r=0.91 P<0.05,HIF-1與CD133 r=0.85 P<0.05,MGMT與CD133 r=0.802 p<0.05,提示三者均存在強(qiáng)正相關(guān)性。
結(jié)論:隨腫瘤級別升高,HIF-1、MGMT、CD133陽性表達(dá)率升高。CD133為已經(jīng)明確的腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物,HIF-1則能使膠質(zhì)瘤細(xì)胞尤其是腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞在缺氧條件下仍能保持生長、分裂活性,對于膠質(zhì)瘤
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