四磷酸脲腺苷誘導(dǎo)大鼠氣管及支氣管收縮作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：氣管平滑肌(ASM)的收縮對(duì)呼吸過(guò)程具有重要的調(diào)節(jié)作用。ASM收縮性增加與氣管高反應(yīng)性相關(guān)，氣管表現(xiàn)出高反應(yīng)性是哮喘和慢性阻塞性肺部疾病的典型特征。胞外核苷酸通過(guò)嘌呤能受體調(diào)節(jié)ASM的收縮，但是其中的信號(hào)通路現(xiàn)在并不完全清楚。四磷酸脲腺苷(Up4A)同時(shí)包含有嘌呤和嘧啶堿基，因此它具有激活P2X和P2Y受體的潛在性。本研究的目的在于通過(guò)探索胞外雙核苷酸對(duì)ASM收縮的影響及其信號(hào)傳導(dǎo)通路而更好的了解胞外核苷酸在肺部的病理生理作用，并

2、進(jìn)一步為肺部功能紊亂疾病的治療尋找新的靶點(diǎn)。
　　 方法：本文通過(guò)典型的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法Myograph檢測(cè)了Up4A對(duì)大鼠氣管及支氣管和人肺內(nèi)支氣管的作用，并通過(guò)受體特異性激動(dòng)劑或者抑制劑檢測(cè)其作用內(nèi)在的信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制。確定可能參與信號(hào)通路的受體后，使用反轉(zhuǎn)錄PCR的方法檢測(cè)了該受體各亞型在大鼠氣管組織上的表達(dá)。
　　 結(jié)果：Up4A能夠誘導(dǎo)大鼠離體氣管及肺外支氣管和人肺內(nèi)支氣管發(fā)生收縮反應(yīng)。P2X受體特異性抑制劑Ip5I

3、能抑制Up4A誘導(dǎo)的收縮，P2受體非特異性抑制劑蘇拉明不能抑制其作用，α，β-Me-ATP介導(dǎo)的P2X受體脫敏也能使Up4A的收縮作用減弱。大鼠氣管及肺外支氣管組織的P2X受體RNA水平檢測(cè)發(fā)現(xiàn)有P2X1、P2X4、P2X6和P2X7亞型的表達(dá)，而P2X3受體表達(dá)量很少。胞外Ca2+螯合劑EGTA、L-型鈣離子通道阻斷劑硝苯地平和RhoA/Rho激酶通路抑制劑H1152處理能顯著抑制Up4A誘導(dǎo)的收縮效應(yīng)。
　　 結(jié)論：Up4A