聚酰胺-胺型樹枝狀分子G5-PAMAM-D傳遞小環(huán)DNA的研究.pdf

1、基因治療是指將外源核酸(如質(zhì)粒DNA、siRNA等)作為基因藥物導(dǎo)入靶細(xì)胞，以此去修復(fù)細(xì)胞遺傳缺陷的一種技術(shù)?，F(xiàn)在我們通常把基因傳遞系統(tǒng)分為病毒載體系統(tǒng)和非病毒載體系統(tǒng)。然而，由于病毒載體在應(yīng)用過程中可能會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的毒性和插入突變所引起的致癌性，其在應(yīng)用中的安全問題受到了人們廣泛質(zhì)疑。因此，探索其他安全有效的基因傳輸系統(tǒng)是基因治療領(lǐng)域的重要任務(wù)之一，非病毒載體由于有效的避免了病毒載體在安全性上的問題，并且具有方便純化，容易制備和修飾等優(yōu)

2、勢(shì)顯示了其潛在的應(yīng)用價(jià)值。但是非病毒載體在實(shí)際應(yīng)用中的一個(gè)瓶頸就是轉(zhuǎn)染效率低。其中一種解決策略就是提高基因自身的表達(dá)效率。小環(huán)(minicircle)DNA載體是一種新型的基因載體，僅由外源基因的表達(dá)盒構(gòu)成，不含有來自細(xì)菌質(zhì)粒的骨架結(jié)構(gòu)，與常用的非病毒載體及質(zhì)粒載體相比，小環(huán)DNA載體克服了轉(zhuǎn)染率低、易引起免疫反應(yīng)及外源基因瞬時(shí)表達(dá)的缺點(diǎn)，是一種安全、高效的新型載體。
　　 本研究利用聚酰胺.胺型樹枝狀高分子聚合物(第五代PAM

3、AM-D，暨G5-PAMAM-D，簡(jiǎn)稱G5)作為小環(huán)DNA載體的遞送系統(tǒng)，研究其與小環(huán)DNA自組裝形成的納米復(fù)合物的理化特征及轉(zhuǎn)染效率。并初步探討其傳輸?shù)膬?nèi)皮抑素基因的抗瘤效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明G5-PAMAM-D包裹小環(huán)DNA形成的納米復(fù)合物具有較高的轉(zhuǎn)染效率，其攜帶的內(nèi)皮抑素基因可以有效抑制HUVEC的增殖、遷移及微管形成能力。該作用與其對(duì)VEGF及VEGFR2下游plc-γ/erk、p38等信號(hào)通路的抑制有關(guān)。本研究的結(jié)果為深入探討聚