馬鈴薯的再生及其再生植株遺傳穩(wěn)定性研究.pdf

1、馬鈴薯再生體系的建立是利用生活的植物細(xì)胞具有全能性的理論基礎(chǔ)，通過(guò)愈傷組織階段，再分化形成新的植株。它是進(jìn)行諸多研究的基礎(chǔ)，特別是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)，更有賴于一個(gè)遺傳穩(wěn)定性高的再生體系。但在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，經(jīng)常會(huì)發(fā)生體細(xì)胞無(wú)性系變異。為進(jìn)一步了解馬鈴薯再生過(guò)程及其再生植株的變異情況，為進(jìn)行其他研究奠定基礎(chǔ)，本試驗(yàn)以馬鈴薯 10 個(gè)品種為供試材料，先以馬鈴薯大西洋品種為基礎(chǔ)對(duì)其再生過(guò)程中的激素種類、濃度、愈傷培養(yǎng)天數(shù)等影響因素

2、進(jìn)行了研究，再將建立起的再生體系應(yīng)用于其他 9 種材料，比較不同基因型之間的再生差異；最后對(duì)大西洋品種的再生植株的遺傳變異進(jìn)行測(cè)定。研究結(jié)果如下： 1.馬鈴薯大西洋品種的葉片與莖段愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基分別為MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.3mg/L、MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.4mg/L，誘導(dǎo)率均可達(dá)100％；葉片與莖段愈傷誘導(dǎo)不定芽分化的最佳培養(yǎng)基都為 MS+6-BA 5.0mg/L+Nhh0.

3、1mg/L+GA<,3> 10mg/L，其不定芽的分化率分別達(dá)100％、73.3％。將上述再生體系用于其它9個(gè)品種，發(fā)現(xiàn)不同基因型馬鈴薯的再生存在較大差異，該再生體系只適用于其中兩個(gè)品種。 2.2，4-D 對(duì)誘導(dǎo)愈傷的效果較好，但它對(duì)不定芽的分化具有一定的抑制作用；而 Ihh 對(duì)愈傷的誘導(dǎo)率不佳，其誘導(dǎo)的愈傷在誘導(dǎo)不定芽分化時(shí)的頻率卻比較高。將不同培養(yǎng)天數(shù)的愈傷用于不定芽分化，發(fā)現(xiàn)葉片愈傷在培養(yǎng)14天后用于不定芽分化效果最好，而

4、莖段愈傷則在培養(yǎng)21天后的效果最佳，但普遍葉片愈傷的分化率要高于莖段的。 3.同時(shí)還發(fā)現(xiàn)GA<,3>在不定芽的分化階段是必不可少的。在未添加GA<,3>的分化培養(yǎng)基上無(wú)芽分化，只要在分化培養(yǎng)基中添加有GA<,3>，基本上都有芽分化，但其最佳濃度為 10mg/L。 4.通過(guò)農(nóng)藝學(xué)性狀的觀察，100 個(gè)再生植株不存在很大程度的變異，只有少數(shù)植株發(fā)生幾個(gè)性狀的微小變化或有極個(gè)別的在個(gè)別性狀上出現(xiàn)較大差異。通過(guò)RAPD 分析，1