氯嘧磺隆高效降解菌的分離篩選及其生物學(xué)特性研究.pdf

1、氯嘧磺隆屬磺酰脲類除草劑，其具有超高效、廣譜、低毒和高選擇性等特點(diǎn)，已在我國廣泛使用，但其殘留期長，易形成農(nóng)田環(huán)境污染，對(duì)后茬敏感作物有嚴(yán)重的藥害，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一個(gè)重要問題。本文針對(duì)氯嘧磺隆殘留的農(nóng)田污染問題，研究其微生物降解技術(shù)，采用搖瓶富集馴化方法分離篩選高效降解菌株，應(yīng)用形態(tài)、生理生化和分子方法對(duì)新菌株進(jìn)行了分類地位鑒定。研究了該菌的主要生物學(xué)特性和降解酶粗酶液的特性，并采用盆栽實(shí)驗(yàn)法對(duì)該株降解菌的效果進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。本研究對(duì)有效

2、控制農(nóng)田農(nóng)藥污染，保障農(nóng)產(chǎn)品安全生產(chǎn)均具有重要的意義。具體研究結(jié)果如下： 1.應(yīng)用搖瓶富集馴化培養(yǎng)方法，從河北、北京、天津等地的農(nóng)藥廠排污口淤泥中分離到1株氯嘧磺隆高效降解菌株E-1。菌株在含10mg/L氯嘧磺隆的液體無機(jī)鹽培養(yǎng)基中，反應(yīng)72h，其降解效率可以達(dá)到94.74％。 2.運(yùn)用形態(tài)、生理生化及分子方法對(duì)該菌株進(jìn)行了鑒定。鑒定結(jié)果顯示，該菌株的16SrDNA基因序列與巨大芽孢桿菌Bacillusmegateriu

3、m的相似性達(dá)到100％，結(jié)合菌株的其他特征，綜合判定該株菌為巨大芽孢桿菌。 3.研究明確了E-1菌株的生長特性和營養(yǎng)特性。E-1菌株在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長迅速，pH5～9均能生長，pH10時(shí)不生長，最適pH為6.0；菌株在15～45℃均能生長，50℃不能生長，最適生長溫度為30℃；菌株生長對(duì)氧氣的需求要量不高，裝瓶量40mL/250mL至200mL/250mL均能良好生長；菌株的最適碳氮源分別為葡萄糖和酵母粉。 4.

4、研究表明：該菌株的降解酶位于細(xì)胞內(nèi)，為誘導(dǎo)型酶。該菌的粗酶液在pH為7.0的磷酸緩沖液中，溫度30℃時(shí)，對(duì)氯嘧磺隆的降解率可達(dá)到52.73％(蛋白含量4.747mg/ml，反應(yīng)30min)；底物氯嘧磺隆的濃度對(duì)粗酶的活性有抑制作用，酶活性隨著氯嘧磺隆濃度的增加而降低，底物氯嘧磺隆濃度從5mg/L上升到50mg/L，酶的降解效率從52.79％降低到27.41％。 5.生測(cè)結(jié)果表明：施用降解菌對(duì)氯嘧磺隆藥污染具有顯著的修復(fù)作用，施用