誘導(dǎo)子對黃芪愈傷組織生長及代謝的影響.pdf

1、本文以毛霉、木霉、青霉、散子囊菌和水楊酸作為誘導(dǎo)子，探討了誘導(dǎo)子對黃芪細(xì)胞培養(yǎng)物生長和次生代謝的影響，研究結(jié)果如下： 毛霉、木霉、青霉、散子囊菌作為誘導(dǎo)子處理黃芪愈傷組織，除木霉以外均能提高黃芪愈傷組織中黃芪總皂苷的含量。在黃芪細(xì)胞培養(yǎng)周期的對數(shù)生長末期加入濃度為80gg/mL的散子囊菌，黃芪總皂苷達(dá)到了11.51mg/g·DW，比對照組提高了31.99％。真菌誘導(dǎo)子的加入可以激發(fā)黃芪細(xì)胞的防御性應(yīng)答反應(yīng)，產(chǎn)生氧進(jìn)發(fā)和一氧化氮進(jìn)

2、發(fā)，細(xì)胞的氧化還原態(tài)勢發(fā)生了明顯的變化，膜脂過氧化產(chǎn)物MDA的含量大幅度提高，POD、PPO、CAT的活力出現(xiàn)波動性的變化，并具有一定的時序性。同時，與次生代謝產(chǎn)物積累有關(guān)的PAL的活力也得到大幅度的提高。 以水楊酸為誘導(dǎo)子添加到黃芪細(xì)胞培養(yǎng)體系后，觀察其對黃芪細(xì)胞培養(yǎng)物次生代謝的影響。選擇出l了水楊酸的最佳添加濃度為10<'-3>mg/L，最佳的添加時間為繼代培養(yǎng)的第28d，以這種方式處理后的黃芪愈傷組織中黃芪總皂苷的含量比對

3、照組提高了29.47％。同時，跟蹤測定了水楊酸作用過程中的氧化酶、PAL活力的變化，以及氧進(jìn)發(fā)和NO進(jìn)發(fā)、膜脂過氧化程度的變化情況。結(jié)果表明：水楊酸加入后引起了黃芪細(xì)胞的過氧化氫和一氧化氮含量瞬間的上升，也使膜脂過氧化產(chǎn)物MDA的含量大幅度提高，同時POD、PPO、PAL的活力始終高于處理組，而CAT的活力則受到抑制。 經(jīng)過80μg/mL的散子囊菌誘導(dǎo)子、10<'-3>mg/L的水楊酸、80μg/mL的散子囊菌誘導(dǎo)子+10<'-

4、3>mg/L 水楊酸3種處理，對黃芪愈傷組織的膜脂過氧化，代謝過程中的酶活力、活性氧和總皂苷含量的影響。結(jié)果表明：真菌誘導(dǎo)子和水楊酸單獨(dú)使用均能引起黃芪細(xì)胞膜脂過氧化，而散子囊菌誘導(dǎo)子+10<'-3>mg/L 水楊酸聯(lián)合處理可以減輕真菌誘導(dǎo)子單獨(dú)處理細(xì)胞所引起的膜脂過氧化程度，散子囊菌誘導(dǎo)子+10<'-3>mg/L 水楊酸聯(lián)合處理與二者單獨(dú)使用相對比，較大地提高了POD和PAL的活力，同時提高細(xì)胞內(nèi)過氧化氫的含量，而且過氧化氫含量升高的