半夏的快繁及誘導(dǎo)子對其愈傷組織總生物堿積累的影響.pdf

1、半夏Pinellia ternata(Thunb)Breit是天南星科半夏屬的多年生草本藥用植物，其塊莖為傳統(tǒng)的中藥材。半夏中的總生物堿是評價(jià)藥材質(zhì)量的重要指標(biāo)和主要有效成分，生物堿在眾多的化學(xué)成分中具有明顯的生物活性和生理功能，具有鎮(zhèn)咳、祛痰、降壓、健脾胃、止嘔吐、降脂、抗心律失常、抗壞血栓以及抗腫瘤和提高記憶之功效，在我國治癌史上有著廣闊的前景。由于半夏受繁殖方法和速度的影響，長期依賴采集野生半夏塊莖入藥的狀況，導(dǎo)致野生資源日益枯竭

2、，市場野生貨源常供不應(yīng)求。本文對半夏的化學(xué)成分和藥理活性進(jìn)行了總結(jié)，對藥品野生資源的開發(fā)和利用進(jìn)行了闡述，并對半夏的發(fā)展前景提出自己的見解。研究不同植物激素配比對半夏快繁的影響，繼代的愈傷組織生長周期和生理生化指標(biāo)的變化，以及單因素誘導(dǎo)子和雙因素誘導(dǎo)子協(xié)同作用對半夏細(xì)胞的生長和總生物堿積累的影響，為提高半夏有效活性成分的含量，培育半夏優(yōu)良品系提供基礎(chǔ)，并獲得以下結(jié)果：
　　 1．不同植物激素配比對半夏組織培養(yǎng)的影響。將半夏的外植

3、體消毒后接種于不同濃度激素組合的MS培養(yǎng)基上，均能產(chǎn)生愈傷組織。MS添加1.5mg/L6-BA和0.3mg/L2，4-D對半夏愈傷組織誘導(dǎo)效果最好；MS+1.0mg/L6-BA和0.4mg/L2，4-D時(shí)比較適合半夏愈傷組織增殖，且愈傷組織生長狀況較好，增殖快；1.0mg/L或2.0mg/L6-BA和0.1mg/L-0.5mg/L NAA時(shí)比較適合半夏愈傷組織的出芽和生根，且植株的生長狀況良好，每株的出芽數(shù)和生根數(shù)都較多。利用植物的組織

4、培養(yǎng)技術(shù)，建立半夏的快繁體系，目的是提高半夏繁殖系數(shù)、加快生產(chǎn)周期和提供優(yōu)質(zhì)種苗。
　　 2．半夏愈傷組織生長周期中生理生化特征的變化。半夏愈傷組織的最佳收獲時(shí)間30天，細(xì)胞的生長曲線呈現(xiàn)“S”形，分為延滯期、對數(shù)生長期和穩(wěn)定期；半夏的愈傷組織在生長的前幾天，細(xì)胞活力，可溶性蛋白含量，苯丙氨酸解氨酶活性基本保持穩(wěn)定，在15-20天左右達(dá)到最高峰，后期又呈現(xiàn)緩慢降低的趨勢；總生物堿含量在0-10天變化很小，在10-30天持續(xù)穩(wěn)定的

5、增長，30-35天呈現(xiàn)小幅度下降的趨勢。生理生化指標(biāo)反映細(xì)胞的生長狀況，通過研究植物的生理生化指標(biāo)，了解次級代謝產(chǎn)物的可能途徑。
　　 3．不同誘導(dǎo)子及協(xié)同作用對半夏細(xì)胞生長和總生物堿積累的影響。研究了單因素誘導(dǎo)子（Ag+，Cu2+，SA，苯丙氨酸，酪氨酸，木霉提取物，酵母提取物）和雙因素誘導(dǎo)子（Ag+和苯丙氨酸，Cu2+和苯丙氨酸，Ag+和酪氨酸，Cu2+和酪氨酸，Ag+和木霉提取物，Cu2+和木霉提取物）對半夏細(xì)胞生長和總生

6、物堿含量積累的影響。非生物誘導(dǎo)子在低濃度時(shí)，對細(xì)胞的生長影響不顯著，在高濃度時(shí)抑制細(xì)胞的生長；各種濃度的苯丙氨酸、酪氨酸、木霉提取物和酵母提取物都有利于半夏細(xì)胞的生長，1.0mg/L Cu2+、30mg/L木霉提取物對細(xì)胞總生物堿的積累影響極顯著。最后，對藥用植物的次生代謝進(jìn)行了總結(jié)，對出現(xiàn)的問題進(jìn)行了探索，同時(shí)對今后的研究方向也作了展望。
　　 4．半夏高生物堿愈傷組織的篩選。通過單因素誘導(dǎo)子及協(xié)同作用對半夏細(xì)胞生長和總生物堿