鵝絨藤總生物堿對(duì)小鼠免疫功能的影響.pdf

1、目的： 研究鵝絨藤總生物堿（Cynanchum Chinense Total Alkaloid，CCTA）對(duì)正常小鼠和環(huán)磷酰胺（Cyclophosphamide，Cy）免疫抑制小鼠免疫功能的影響。 方法：試驗(yàn)分為兩部分。 第一部分、CCTA對(duì)正常小鼠免疫功能的影響 小鼠AFC、血清溶血素（IgM）測(cè)定：ICR小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只：正常對(duì)照組，免疫小鼠對(duì)照組，CCTA高、中、低劑量組。前兩組

2、腹腔注射（ip）生理鹽水(NS)10ml/kg，后三組分別ip CCTA 12.96mg/kg、6.48mg/kg、3.24mg/kg，每日1次，連續(xù)7日。除正常對(duì)照組外，其余各組均于給藥第3天一次性ip 5％的SRBC 0.2mL。末次給藥后12h，所有小鼠眼球取血并取脾臟，QHS試驗(yàn)測(cè)定AFC，分光光度法測(cè)定血清溶血素。 其它免疫學(xué)指標(biāo)測(cè)定：ICR小鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組10只：正常對(duì)照組，CCTA高、中、低劑量組。正

3、常對(duì)照組小鼠分別ip NS 10ml/kg，其他三組小鼠分別ip CCTA 12.96mg/kg、6.48mg/kg、3.24mg/kg，每日1次，連續(xù)7日。于末次給藥后12h，眼球取血并取脾臟、胸腺。中性紅吞噬實(shí)驗(yàn)測(cè)定腹腔MΦ吞噬活性；MTT法測(cè)定ConA誘導(dǎo)的脾T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)能力和NK細(xì)胞的殺傷活性；ELISA法測(cè)定血清IL-4和IFN-?含量；脾臟、胸腺稱重計(jì)算脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)。 第二部分、CCTA對(duì)Cy免疫抑制小鼠

4、免疫功能的影響 ICR小鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組10只：正常對(duì)照組、Cy模型組，CCTA高、中劑量組。前兩組ip NS 10ml/kg，后兩組分別ip CCTA 12.96mg/kg、6.48mg/kg，每天1次，連續(xù)7天。于給藥第4天，后三組一次性ip Cy 50mg/kg造模。末次給藥后12h，所有小鼠取脾臟并眼球取血。MTT法測(cè)定ConA誘導(dǎo)的脾T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)能力和NK細(xì)胞的殺傷活性；ELISA法測(cè)定血清IL-4和

5、IFN-?含量。 結(jié)果： 第一部分：①與正常對(duì)照組（2.75±0.23 mg/kg）、CCTA低劑量組（2.76±0.27mg/kg）比較，CCTA高劑量組（3.10±0.33mg/kg）和中劑量組（3.09±0.30mg/kg）可顯著提高正常小鼠的胸腺指數(shù)；正常對(duì)照組（4.60±0.47mg/kg），CCTA低劑量組（4.64±0.22mg/kg）、中劑量組（4.84±0.24mg/kg）和高劑量組（4.74±0.40

6、 mg/kg）間脾臟指數(shù)無顯著差異。②與正常對(duì)照組（0.131±0.012）、CCTA低劑量組（0.143±0.015）比較，CCTA高劑量組（0.162±0.020）和中劑量組（0.171±0.021）可明顯增強(qiáng)正常小鼠腹腔MΦ吞噬功能（P﹤0.01或P﹤0.05）。③與免疫小鼠對(duì)照組（0.509±0.073）、CCTA低劑量組（0.529±0.090）比較，CCTA高劑量組（0.624±0.130）、中劑量組（0.607±0.100

7、）抗體形成細(xì)胞OD值明顯增高（P﹤0.01或P﹤0.05）；與免疫小鼠對(duì)照組（19.033±8.543）、CCTA低劑量組（20.988±6.138）比較，CCTA高劑量組（33.951±10.356）、中劑量組（32.613±9.139）血清溶血素HC50升高（P﹤0.01或P﹤0.05）。④與正常對(duì)照組（1.214±0.077）和CCTA低劑量組（1.255±0.126）比較，CCTA高劑量組（1.749±0.142）和中劑量組（1

8、.883±0.259）均能夠提高正常小鼠ConA誘導(dǎo)的脾T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)能力（P﹤0.01或P﹤0.05）。⑤與正常對(duì)照組（48.364±5.486％）、CCTA低劑量組（50.041±8.405％）比較，CCTA高劑量組（59.656±7.616％）和中劑量組（63.144±6.456％）明顯提高正常小鼠脾臟NK細(xì)胞的殺傷率。⑥與正常對(duì)照組（119.688±11.849pg/ml）、CCTA低劑量組（122.466±11.720pg

9、/ml）比較，CCTA高劑量組（133.626±3.095pg/ml）和中劑量組（133.874±4.080pg/ml）可明顯提高正常小鼠血清IL-4的水平（P﹤0.01或P﹤0.05）；正常對(duì)照組（68.614±4.584pg/ml）、CCTA高劑量組（70.055±2.781pg/ml）、中劑量組（69.823±4.323pg/ml）、低劑量組（68.986±3.602pg/ml）間IFN-γ含量無明顯差異。 第二部分：①與

10、Cy模型組（1.081±0.069）比較，Cy+CCTA中劑量組（1.193±0.154）可提高Cy免疫抑制小鼠ConA誘導(dǎo)的脾T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)能力（P﹤0.05）。②與Cy模型組（31.081±8.982％）比較，Cy+CCTA高劑量組（39.967±9.929％）和Cy+CCTA中劑量組（41.816±11.435％）均可提高Cy免疫抑制模型小鼠的NK殺傷活性（P﹤0.05）。③與Cy模型組（83.331±11.237pg/ml）

11、比較，Cy+CCTA高劑量組（93.995±8.805pg/ml）和Cy+CCTA中劑量組（97.765±7.971pg/ml）可明顯提高Cy免疫抑制小鼠血清IL-4的水平（P﹤0.01或P﹤0.05）；與Cy模型組（61.041±3.414pg/ml）比較，Cy+CCTA中劑量組（66.106±5.011pg/ml）小鼠血清IFN-γ含量明顯升高（P﹤0.01）。 結(jié)論： 1、高劑量（12.96mg/kg）和中劑量（6