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文檔簡介
1、目的:研究鵝絨藤總生物堿(CynanchumChinenseTotalAlkaloid,CCTA)對體外培養(yǎng)的腫瘤細胞株的增殖抑制作用及其作用機制的初步探索。
方法:以人宮頸癌細胞Hela、人結(jié)腸癌細胞SW480、人前列腺癌細胞PC3為研究對象,以小鼠成纖維細胞3T3作為正常對照,用不同濃度的鵝絨藤總生物堿提取物(CCTA)分別對上述細胞作用24h、48h、72h、96h后,在普通光學顯微鏡下觀察細胞形態(tài)的變化,用MTT法檢測
2、其生長抑制率,選取對CCTA敏感的細胞株,用流式細胞儀檢測不同濃度下的CCTA對其細胞周期及凋亡率的影響。
結(jié)果:①經(jīng)過CCTA處理,Hela細胞和SW480細胞在光學顯微鏡下可見細胞形態(tài)發(fā)生明顯變化,細胞密度減小,伸展性減弱、細胞邊緣發(fā)亮,貼壁性減弱,胞質(zhì)內(nèi)可見發(fā)泡現(xiàn)象;而3T3細胞和PC3細胞則變化不明顯;②與正常對照組相比,CCTA對Hela細胞及SW480細胞的抑制作用較為明顯,而對PC3和3T3細胞則無明顯抑制作用;
3、且隨著CCTA濃度的增加以及作用時間的延長,對Hela和SW480細胞的抑制作用逐漸增強,呈現(xiàn)出明顯的時間劑量依賴性;尤其對于SW480細胞,當CCTA濃度達到2g·L-1作用96小時后細胞幾乎全部死亡;③隨著CCTA的濃度及作用時間的增加,Hela細胞位于S期的細胞明顯增多,而SW480細胞位于G0/G1期的細胞明顯增多;流式細胞儀檢測到隨著CCTA作用時間和劑量的增加,Hela細胞及SW480細胞的凋亡率均有增高,當CCTA濃度為1
4、.5g·L-1作用48小時和72小時時,Hela細胞凋亡率分別為14.8%和15.36%;SW480細胞的凋亡率分別為34.33%和41.46%。
結(jié)論:
1、在本實驗條件下,CCTA對小鼠正常成纖維細胞3T3無細胞毒作用;
2、CCTA對人宮頸癌細胞Hela及人結(jié)腸癌細胞SW480表現(xiàn)出明顯的抑制作用,且呈時間和劑量依賴性;而對人前列腺癌細胞PC3則抑制不明顯;
3、CCTA通過調(diào)控細胞周期和誘
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