板藍(lán)根生物堿的體外抗菌抗病毒作用研究.pdf

1、本試驗(yàn)探索板藍(lán)根生物堿的提取工藝,測(cè)定板藍(lán)根生物堿的抗菌及抗病毒活性,熒光定量檢測(cè)板藍(lán)根生物堿的抗病毒活性。
　　 本試驗(yàn)采用醇提法從板監(jiān)根中提取板藍(lán)根水溶性生物堿和脂溶性生物堿,采用倍比稀釋法測(cè)定其最低抑菌濃度(MIC),測(cè)定其對(duì)豬腎細(xì)胞(PK-15細(xì)胞)的最大無(wú)毒濃度(TC0)、半數(shù)中毒濃度(TC50),應(yīng)用MTT法先加藥物后接病毒、先接病毒后加藥物、病毒和藥物同時(shí)加入、病毒和藥物體外作用2h后再加入四種方式測(cè)定了生物堿的體

2、外抗PPV效果,用熒光定量PCR檢測(cè)板藍(lán)根生物堿抗豬細(xì)小病毒的效果。
　　 板藍(lán)根生物堿的提取結(jié)果表明:板藍(lán)根藥物中水溶性生物堿的提取率為0.044％,板藍(lán)根脂溶性生物堿的提取率為0.50％。
　　 體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明:板藍(lán)根水溶性生物堿對(duì)金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、魏氏梭菌、沙門氏菌、綠膿桿菌的最小抑菌濃度分別是175、175、87.5、350、43.75mg/ml,對(duì)雞源大腸桿菌沒有測(cè)到最小抑菌濃度；對(duì)金黃色葡萄

3、球菌、蠟樣芽孢桿菌、魏氏梭菌、沙門氏菌、綠膿桿菌的抑菌圈分別是8、7、10、6.3、8.3mm,對(duì)雞源大腸桿菌沒有測(cè)到抑菌圈。板藍(lán)根脂溶性生物堿對(duì)金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、魏氏梭菌、沙門氏菌、綠膿桿菌的最小抑菌濃度分別是50、25、25、100、100mg/ml,對(duì)雞源大腸桿菌沒有測(cè)到最小抑菌濃度；對(duì)金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、魏氏梭菌、沙門氏菌、綠膿桿菌的抑菌圈分別是10.3、16、12.3、11.3、11mm,雞源大腸桿菌沒有

4、測(cè)到抑菌圈。
　　 體外抗病毒試驗(yàn)結(jié)果表明:板藍(lán)根水溶性生物堿TCo、TC50分別為1mg/ml、0.95mg/ml,脂溶性生物堿的TCo、TC50分別為0.5mg/ml、0.105mg/ml；兩種生物堿均有一定的抗PPV作用,其中水溶性生物堿以先加藥物后加病毒的方式抗病毒效果較好。脂溶性生物堿以先接種病毒后加藥及病毒和藥物體外作用2h后再同時(shí)加入的方式抗病毒效果較好,且與其濃度呈正相關(guān)。
　　 本實(shí)驗(yàn)建立了SYBR G