金釵石斛中生物堿積累規(guī)律及抗腫瘤活性研究.pdf

1、金釵石斛(Dendrobium nobileLindl)，蘭科石斛屬多年生草本，是我國珍稀的藥用植物。本試驗以金釵石斛莖為材料，以溴甲酚綠來檢測提取液中的生物堿含量，探究其的積累規(guī)律。并且以單因素實驗結(jié)果為依據(jù)，利用Box-Behnke響應(yīng)面分析法獲得最佳提取工藝條件。對純化后的金釵石斛生物堿進行抗腫瘤活性測定。而且對每一月份的金釵石斛莖和葉中的生物堿含量進行檢測與分析，具體研究內(nèi)容及實驗結(jié)論如下:
　　實驗通過對金釵石斛莖（上部

2、，下部）、葉每個月的生物堿含量的測定，可以看到，隨著月份的變動，生物堿的含量也在變動。從總體上看來，金釵石斛莖和葉的部分的生物堿含量在8-11月期間迅速積累，9-10月到達(dá)整年的最高值，石斛莖的上部，下部和葉的生物堿含量分別為1.25、0.77、2.12mg/g，這與金釵石斛11月的采收期是相符合的。12月過后表現(xiàn)出總體下降趨向，在3月-4月期間會有少量增長。其中，上半部分，下半部分年平均含量分別為0.77、0.51mg/g，可以看出，

3、金釵石斛生物堿的含量是莖的上半部分大于下半部分的。
　　用酶液對金釵石斛經(jīng)過一段時間的處理后熱回流提取，以單因素數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，對酶處理過程中的酶含量、溫度、時間和酶液的PH環(huán)境等參量進行考察。從單因素的實驗結(jié)果可以看出來，酶含量、酶處理溫度和酶處理的pH值對生物堿的提取有顯著的作用效果。確定它們?yōu)樘崛」に嚾蛩?，進行三因素三水平的響應(yīng)面優(yōu)化實驗，得到了最合適的提取條件:酶含量為2.34mg/ml，酶處理溫度為41.91℃，pH值為5

4、.08。在此前提下的金釵石斛莖多酚實際提取量為:0.821±0.03(mg/g)，接近于理論預(yù)測值0.850(mg/g)，說明優(yōu)化后的提取條件能成功提高金釵石斛莖中總生物堿的提取率。
　　近年來，生物堿在抗腫瘤方面的醫(yī)學(xué)價值愈發(fā)得到關(guān)注。大量的藥理實驗研究結(jié)果表明:天然植物中，特別是一些具有藥用價值的植物中的一些物質(zhì)通過抑制腫瘤細(xì)胞的增殖從而達(dá)到一定的醫(yī)學(xué)效果，如喜樹堿、苦參堿等。
　　在本次實驗中，采用了CCK-8法檢測金