EGCG納米粒的制備及其體外抗腫瘤活性研究.pdf

1、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)是綠茶中含量最多的兒茶素，具有抗氧化、清除自由基、抗腫瘤、預(yù)防癌癥等多種功效，其抗腫瘤機(jī)理主要是抗氧化、誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡、阻滯癌細(xì)胞周期、造成癌細(xì)胞DNA損傷和影響細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)等多個(gè)方面。然而EGCG的不穩(wěn)定性和生物利用率低等缺點(diǎn)嚴(yán)重限制了其在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。納米技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是可以提高芯材的溶解度、穩(wěn)定性和生物利用率，納米載體作為藥物載體，具有緩釋作用、位點(diǎn)特異性等特點(diǎn)，在疾病防治方面有重要前

2、景。β-乳球蛋白(β-lg)是由反芻動(dòng)物乳腺上皮細(xì)胞分泌的重要的水溶性乳清蛋白，其可作為EGCG的納米載體并改善EGCG穩(wěn)定性的功能已被提出。維生素C(Vc)是一種具有抗氧化、抗癌和預(yù)防癌癥等功能的水溶性多羥基化合物，有研究表明其與茶多酚聯(lián)用能改善后者穩(wěn)定性。
　　本文以β-lg為載體，與EGCG和Vc制備成新型EGCG納米粒，研究其穩(wěn)定性、體外抗腫瘤活性和抗腫瘤機(jī)制。
　　(1)β-lg熱激溫度75℃，緩沖體系pH6.5，

3、EGCG、Vc與β-lg質(zhì)量比1∶1∶1.2，熱誘導(dǎo)法制備得到EGCG納米粒粒徑約30.48 nm，Zeta電位-41.4 mV，分散系數(shù)PDI0.134，EGCG包埋率53.23％，載藥量928.97 nmol·mg-1。隨著時(shí)間的延長，EGCG納米粒粒徑、Zeta電位、PDI、EGCG包埋率和載藥量都增大。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明EGCG納米粒在48 h內(nèi)處于較穩(wěn)定狀態(tài)。
　　(2) MTT實(shí)驗(yàn)表明EGCG納米粒對(duì)A375、TE-1細(xì)胞抑

4、制作用顯著性優(yōu)于EGCG組，在某些濃度條件下優(yōu)于EGCG非納米粒，表明EGCG納米粒相對(duì)EGCG有體外腫瘤抑制增效作用。
　　(3) AnnexinⅤ-FITC染色和單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)表明EGCG濃度為40μg/mL和60μg/mL時(shí)，EGCG納米粒對(duì)A375、TE-1細(xì)胞的凋亡和DNA損傷有較好的增效作用;流式細(xì)胞術(shù)研究EGCG納米粒對(duì)腫瘤細(xì)胞周期的影響，結(jié)果表明在20μg/mL、40μg/mL低濃度時(shí)，A375、TE-1細(xì)胞主