去甲斑蝥素-羥丙基殼聚糖納米粒的制備及其體外抗腫瘤性能研究.pdf

1、目的：以殼聚糖（CS）為初始原料，制備水溶性羥丙基殼聚糖（HPCS），進(jìn)而制備去甲斑蝥素—羥丙基殼聚糖固體納米粒（NCTD-HPCS-NPs），并研究該載藥納米粒對(duì)比原藥去甲斑蝥素的體外釋藥性能，以及對(duì)肝癌細(xì)胞BEL-7402的體外增殖抑制作用。
　　方法：采用堿化交聯(lián)法制備羥丙基殼聚糖，離子交聯(lián)法制備去甲斑蝥素-羥丙基殼聚糖固體納米粒，并應(yīng)用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化各自制備條件；掃描電鏡觀察固體納米粒的形態(tài)特性，透析法測(cè)定納米粒的體外釋

2、藥性；MTT法檢測(cè)NCTD及NCTD-HPCS-NPs固體納米粒分別對(duì)肝癌細(xì)胞BEL-7402體外增殖抑制作用，并測(cè)定其各自半數(shù)抑制濃度（IC50）。
　　結(jié)果：
　　1.羥丙基殼聚糖制備結(jié)果表明，HPCS最佳制備條件為：M殼聚糖：V環(huán)氧丙烷：V四甲基氫氧化銨=1:10:0.5，T=60℃，此條件下所得HPCS平均取代度為0.42，溶解度為7.5 g/L左右，具有較好的水溶性和良好的穩(wěn)定性。
　　2.載藥納米顆粒制備結(jié)

3、果表明：NCTD-HPCS-NPs最佳制備條件（濃度）為NCTD2.0 mg/mL、HPCS1.0mg/mL和TPP1.0mg/mL，所制得納米顆粒平均粒徑為95.15±3.81 nm，包封率為23.68±1.79％，載藥量為54.53±2.61%，整體粒徑較小，性質(zhì)穩(wěn)定。
　　3.載藥納米粒體外釋藥性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，NCTD體外釋藥時(shí)間平均為3.5 h左右，釋藥量為95%以上，且在開始釋藥1.5 h左右存在明顯突釋現(xiàn)象；NCTD-

4、HPCS-NPs平均釋藥時(shí)間則為6h左右，同樣在開始1h左右存在小幅突釋現(xiàn)象，之后表現(xiàn)出明顯的緩釋作用，最高釋藥量為80%左右。
　　4. MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：加藥24h后，低濃度（CNCTD=10μg/mL）時(shí)，NCTD體外抑癌活性稍高于NCTD-HPCS-NPs，中濃度（20μg/mL≤CNCTD≤80μg/mL）時(shí)，NPs抑癌活性則稍高于NCTD，高濃度（160μg/mL≤CNCTD≤640μg/mL）時(shí)，NPs抑癌活性更具

5、優(yōu)勢(shì)，NPs給藥24 h后可到66.46%左右；通過(guò)Origin8.0軟件分析處理，獲得NCTD對(duì)肝癌細(xì)胞BEL-7402的半數(shù)抑制濃度IC50為283.72±4.55μg/mL，NPs的IC50為194.26±3.69μg/mL，相比NCTD降低了30%左右。
　　結(jié)論：
　　1.制備出的羥丙基殼聚糖，具有較好的水溶性。
　　2.NCTD-HPCS-NPs載藥固體納米粒粒徑較小、載藥量高、性質(zhì)穩(wěn)定。
　　3.載