黃連生物堿對解偶聯(lián)蛋白2的影響.pdf

1、糖尿病及其并發(fā)癥已成為世界范圍內(nèi)嚴(yán)重的公共健康問題?，F(xiàn)代研究表明，糖尿病及其發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展與氧化應(yīng)激密切相關(guān)。而作為細(xì)胞活動“動力工廠”的線粒體在能量代謝中占據(jù)十分重要的位置，同時(shí)也與細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species， ROS)的生成與清除密切相關(guān)。解偶聯(lián)蛋白2(uncoupling protein2，UCP2)為線粒體內(nèi)膜上的質(zhì)子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，分布廣泛。UCP2具有很高的質(zhì)子轉(zhuǎn)運(yùn)活性，能使質(zhì)子直接進(jìn)入線粒體基

2、質(zhì)而不產(chǎn)生ATP，從而消耗儲存在質(zhì)子電化學(xué)勢能中的自由能，避免了活性氧的產(chǎn)生。
　　 黃連是一種傳統(tǒng)中藥，其使用歷史悠久，藥理廣泛。本論文對黃連中四種主要生物堿體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)對于靶點(diǎn)UCP2的作用及抗氧化活性進(jìn)行研究，并根據(jù)它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)來探索其作用機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)的開展將為黃連的進(jìn)一步利用做好理論基礎(chǔ)。
　　 (1)四種生物堿影響體外UCP2表達(dá)及抗氧化活性研究
　　 通過線粒體抗氧化、細(xì)胞抗氧化以及蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)，

3、測定黃連生物堿對H2O2自由基的清除能力，細(xì)胞內(nèi)活性氧、SOD酶活力的影響以及對UCP2表達(dá)的影響。對結(jié)果進(jìn)行對比分析，來研究四種生物堿對UCP2表達(dá)的影響及抗氧化活性的關(guān)系。結(jié)果如下:
　　 1)促進(jìn)UCP2表達(dá)量的對比:黃連堿最強(qiáng)，小檗堿次之，巴馬汀與表小檗堿作用不明顯;
　　 2)抗氧化活性:
　　 四種生物堿于體外線粒體清除H2O2自由基及細(xì)胞內(nèi)抑制活性氧的生成，都有效果，說明四種生物堿都具有抗氧化的作用