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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:Ghrelin是一種神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素促分泌劑受體的內(nèi)源性配體,它作用于GHSR,增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度,刺激GH釋放,本研究運(yùn)用膜片鉗等技術(shù)和受體阻滯劑探討Ghrelin的作用機(jī)制。
方法:運(yùn)用RT-PCR技術(shù)測(cè)定Ghrelin的序列;同時(shí)運(yùn)用Western-blot檢測(cè)GHS-1R的表達(dá)水平;采用特異性受體阻滯劑和膜片鉗技術(shù)測(cè)定細(xì)胞的電生理活動(dòng)。
結(jié)果:在本研究中,我們?cè)谛∈笊?xì)胞中發(fā)現(xiàn)其具有調(diào)節(jié)T
2、型鈣離子通道的功能。Ghrelin在0.1μM濃度時(shí)可逆性抑制T通道電流約31%。這種抑制作用可被1A型生長(zhǎng)激素促分泌劑受體阻斷劑D-Lys3-GHRP-6拮抗。電極內(nèi)應(yīng)用GDP-β-S或孵浴PTX后可完全阻斷Ghrelin的作用。此外,Ghrelin誘導(dǎo)的T電流抑制可被PLC阻斷劑U73122阻斷。經(jīng)典及新型的PKC阻斷劑GF109203X可顯著抑制Ghrelin誘導(dǎo)的T電流作用,而單純經(jīng)典PKC阻斷劑RO31-8220并無(wú)作用。同樣
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