氟鋁暴露對大鼠子代學習記憶與氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)及乙酰膽堿的影響.pdf

1、目的：探討親代孕哺期及子代成年前氟鋁聯(lián)合暴露對仔鼠學習記憶及海馬氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)及乙酰膽堿的影響。
　　方法:SD成年大鼠54只，隨機分為9組，每組6只，按雌雄比2:1交配。采用自由飲水方式對孕鼠（從受孕第0天至產(chǎn)子22天哺乳期結(jié)束）及其仔鼠（斷乳后，第22至60天）染毒。各組飲水中NaF，AlCl3濃度分別為（0，0）、（100，0）、（200，0）、（0，500）、（0，1000）、（100，500）、（100，1000）、（

2、200，500）、（200，1000） mg/L。染毒90天，每隔2周稱1次體重。仔鼠處死前，觀察仔鼠生理發(fā)育及神經(jīng)反射行為指標；Morris水迷宮測試學習記憶能力；收集12 h尿。仔鼠處死后，留取大腦，尿氟、腦氟濃度均采用離子選擇電極法，尿鋁、腦鋁濃度均采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法測定；HE染色、顯微鏡下觀察海馬病理形態(tài)變化；ELISA法測定海馬 GABA、ASP含量；氨基酸自動分析儀分析海馬 Glu和Gly的含量；免疫組化法檢測海

3、馬區(qū)AchE、ChAT蛋白表達水平。
　　結(jié)果：1、仔鼠一般情況：實驗期間，隨著氟、鋁染毒濃度的升高，仔鼠體重逐漸降低。與對照組相比，除第0周時低氟組、低鋁組，第3周時低氟組、低氟+低鋁組、低氟+高鋁組，第6周時低氟組外，其余各染毒組仔鼠的體重均降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；組間兩兩比較：低氟+高鋁組與低氟組相比，仔鼠體重（0、6、9周）降低（P<0.05）；高氟+高鋁組與高氟組相比，仔鼠體重（0、9周）降低（P<0.

4、05）。2、尿、腦的氟、鋁水平：與對照組相比，除氟單獨染毒組外，其余各染毒組仔鼠尿鋁、腦鋁水平升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；除鋁單獨染毒組外，其余各染毒組仔鼠尿氟、腦氟水平升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；且隨著氟、鋁染毒劑量的增加，仔鼠尿液及腦組織氟、鋁含量逐漸升高。3、腦重系數(shù)、海馬CA3區(qū)病理：各染毒組仔鼠腦重系數(shù)與對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；隨著氟、鋁染毒濃度的增加，仔鼠海馬 CA3區(qū)出現(xiàn)不同程

5、度病理損傷。4、生理發(fā)育、神經(jīng)行為反射情況：與對照組相比，除低氟組、低鋁組及低氟+低鋁組外，其余各染毒組仔鼠平面翻正、懸崖回避反射時間延長，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；各染毒組仔鼠睜眼、出牙時間，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。5、空間學習記憶能力：隨著氟、鋁染毒劑量的增加，各染毒組仔鼠表現(xiàn)出不同程度的空間學習記憶能力損傷。與對照組相比，第1、2、3天，除低氟組、低鋁組及低氟+低鋁組外，其余各染毒組仔鼠逃避潛伏期延長，差異有統(tǒng)計

6、學意義（P<0.05）；第4天，各染毒組仔鼠逃避潛伏期延長，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；且仔鼠逃避潛伏隨著訓練周期的改變和氟、鋁染毒濃度的下降而逐漸縮短。與對照組相比，除低氟組、低氟+低鋁組外，其余各染毒組仔鼠首次達平臺時間延長，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；各染毒組仔鼠穿越平臺次數(shù)減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。組間兩兩比較：低氟+低鋁組與低氟組、高氟+低鋁組與高氟組相比，逃避潛伏期（第4天）明顯縮短（P<0.05）

7、；低氟+高鋁組與低氟組相比，逃避潛伏期（第2、3、4天）延長（P<0.05）；高氟+高鋁組與高氟組相比，逃避潛伏期（第2、4天）延長（P<0.05）。6、海馬氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的含量：與對照組相比，各染毒組仔鼠海馬區(qū)Glu、Asp含量降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；除低氟+低鋁、低氟+高鋁組外，GABA含量上升，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；Gly含量變化，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。組間兩兩比較：低氟+低鋁組與低氟組相

8、比，Glu含量升高、GABA含量降低（P<0.05）；低氟+高鋁組與低氟組相比，Glu、GABA含量降低（P<0.05）；高氟+低鋁組與高氟組相比，GABA含量升高（P<0.05）；高氟+高鋁組與高氟組相比，Glu含量降低、GABA含量升高（P<0.05）。7、海馬AchE、ChAT表達改變：與對照組相比，各染毒組仔鼠海馬 AchE、ChAT的積分光密度值，差異無統(tǒng)計學意義（P<0.05）。8、氟、鋁聯(lián)合作用：氟鋁聯(lián)合暴露對仔鼠生理發(fā)育

9、、神經(jīng)行為反射時間、首次達臺時間、海馬區(qū)Gly、Asp濃度及海馬AchE、ChAT表達的影響的影響尚未見交互作用（P＞0.05）；對仔鼠體重、逃避潛伏期、穿越平臺次數(shù)及海馬Glu、GABA含量的影響存在交互作用（F=8.065、7.521、4.961、9.653、36.274，P<0.05），除對仔鼠體重（第0周）、尿氟影響為協(xié)同作用外，其余均為拮抗作用。其中，仔鼠的尿氟濃度值隨著染鋁濃度增加而逐漸升高，腦氟濃度值隨著鋁元素的攝入而減少

10、。
　　結(jié)論：1、親代孕哺期至子代成年前氟鋁聯(lián)合暴露可引起子代空間學習記憶能力降低；2、親代孕哺期至子代成年前氟鋁聯(lián)合暴露可降低子代海馬興奮性氨基酸Glu水平、升高抑制性GABA水平；3、親代孕哺期至子代成年前氟鋁聯(lián)合暴露可抑制子代生長發(fā)育；4、本實驗條件下，低劑量氟和鋁聯(lián)合中毒形式對仔鼠體重（3，6，9周）、逃避潛伏期、穿越平臺次數(shù)及海馬興奮性氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)Glu、GABA水平主要表現(xiàn)為輕微、有限的競爭拮抗，高劑量及更長時間染