曲安奈德膽管洗脫支架的制作及其在膽管良性狹窄中的應(yīng)用.pdf

1、目的
　　制作一種新型可以緩釋曲安奈德的膽道支架，觀察帶藥支架藥物釋放的規(guī)律,并評(píng)價(jià)其在兔膽管良性狹窄模型中應(yīng)用的有效性及安全性。
　　方法
　　第一部分將曲安奈德和聚乳酸-羥基乙酸（PLGA）粉末以20%的帶藥濃度溶于兩者的共同溶劑四氫呋喃（THF）中。并將6Fr膽道引流管浸剪成數(shù)個(gè)50mm段泡于上述溶劑中，10分鐘后取出真空烘干，常溫避光保存。通過(guò)測(cè)重計(jì)算支架所載曲安奈德的質(zhì)量；采用磷酸鹽緩沖液（PBS，PH7.4

2、）將曲安奈德稀釋為系列標(biāo)準(zhǔn)液，在240nm紫外分光峰面積進(jìn)行相關(guān)分析。將曲安奈德支架放入8mlPBS中，置于37℃的恒溫?fù)u床中持續(xù)浸泡48h，然后換新鮮的PBS重復(fù)浸泡，直至第40天。以標(biāo)準(zhǔn) PBS液為對(duì)照組，對(duì)第1-40天留取的浸出液進(jìn)行色譜分析，計(jì)算曲安奈德在浸出液中的濃度。
　　第二部分選用健康新西蘭白兔36只，隨機(jī)分3組，藥物支架組（12只），普通支架組（12只）及對(duì)照組（12只）。電灼損傷膽總管隨后經(jīng)十二指腸乳頭逆向插入

3、支架至膽總管中,對(duì)照組僅電灼膽總管，無(wú)特殊處理，術(shù)后觀察動(dòng)物的一般狀況、生存率，肝功能變化。30 d后取狹窄處標(biāo)本，HE染色光鏡下觀察膽管組織，免疫組織化學(xué)SP法測(cè)量TGF-β1及α-SMA的表達(dá)。
　　結(jié)果
　　第一部分稱量測(cè)得平均每根支架上曲安奈德的負(fù)載量為510μg,單位面積的載藥量為1.63μg/mm2。曲安奈德均能從支架表面持續(xù)釋放，前5天濃度波動(dòng)在6.32μg/ml到8.78μg/ml之間，前5天共釋放曲安奈德1

4、80.61μg，占總釋放量的47.23％，之后濃度平穩(wěn)波動(dòng)在1.85到3.51μg/ml之間，第23天后開(kāi)始降低，第33天的洗脫濃度為0.53μg/ml，隨后即不可測(cè)得。
　　第二部分植入藥物及普通支架均可有效預(yù)防膽總管損傷后狹窄的形成，肝功能檢測(cè)兩支架組血清總膽紅素?zé)o明顯升高，藥物支架組血清總膽紅素波動(dòng)在0.61μmol/l將至0.73μmol/l之間，普通支架組血清總膽紅素波動(dòng)在0.54μmol/l將至0.75μmol/l之間

5、，對(duì)照組肝功能持續(xù)升高。病理學(xué)觀察藥物支架組膽管無(wú)纖維化增生，電灼處膽管直徑較普通支架組略大。對(duì)照組電灼處管腔狹窄，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，黏膜下膠原纖維增生明顯。免疫組化可見(jiàn)α-SMA、TGF-β1強(qiáng)表達(dá)于對(duì)照組狹窄膽管，在普通支架組電灼處膽管表達(dá)也較強(qiáng)，弱表達(dá)于藥物支架組電灼處膽管，兩支架組之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論
　　第一部分用PLGA作為藥物載體能成功制備曲安奈德藥物膽道洗脫支架；體外研究表明該藥物洗脫支