白細(xì)胞介素10對(duì)HK-2細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響及其機(jī)制的初步探討.pdf

1、目的：探討白細(xì)胞介素10對(duì)腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響，并初步討論其作用機(jī)制。 方法：本實(shí)驗(yàn)采用HK-2細(xì)胞為靶細(xì)胞。將HK-2細(xì)胞完全隨機(jī)分為5組：①對(duì)照組：5.5mmol/L的D-葡萄糖組；②高糖組：30mmol/L的D-葡萄糖組；③1 ng/ml IL-10組：30mmol/L的D-葡萄糖+1 ng/ml IL-10組；④5 ng/ml IL-10組：30mmol/L的D-葡萄糖+5 ng/ml IL-1O組；⑤25ng/m

2、l IL-10組：30mmol/L的D-葡萄糖+25 ng/ml IL-10組。培養(yǎng)48h后，倒置顯微鏡觀察HK-2細(xì)胞的形態(tài)變化；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)各組細(xì)胞Ecad、α-SMA蛋白的表達(dá)：RT-PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞PDGF mRNA、CTGF mRNA的表達(dá)；westem blot法檢測(cè)各組細(xì)胞PDGF、E-cad、α-SMA蛋白的表達(dá)；ELISA法檢測(cè)各組細(xì)胞上清液中FN的含量。 結(jié)果：(1)細(xì)胞形態(tài)：對(duì)照組細(xì)胞呈鵝卵石樣緊

3、密排列生長(zhǎng)；高糖組部分細(xì)胞間隙增大，和附近的細(xì)胞脫離接觸，失去鵝卵石樣形態(tài)，呈梭形；1 ng/ml組、5 ng/ml組、25 ng/ml IL-10組細(xì)胞形態(tài)介于對(duì)照組和高糖組之間。(2)高糖組與對(duì)照組相比，E-cad表達(dá)減少，PDGF、CTGF、α-SMA和FN表達(dá)增加，其差異均有顯著性(P＜0.05)，提示高糖可誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞轉(zhuǎn)分化。(3)1 ng/ml組、5 ng/ml組、25 ng/ml IL-10組與高糖組相比，E-cad表