nm23、VEGF-C和Podoplanin在食管鱗癌中的表達及意義.pdf

1、目的:食管癌是人類較常見的惡性腫瘤之一,它嚴重威脅著人類的生命和健康。在我國,食管癌死亡率僅次于胃癌居第二位。食管癌死亡率較高的主要因為主要是由于食管癌的早期癥狀不甚明顯,多數(shù)患者在確診時已達癌癥的中晚期而延誤了最佳治療時機。
　　 已知淋巴道轉(zhuǎn)移是食管癌最重要的轉(zhuǎn)移途徑。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是癌的不利預(yù)后因素,食管癌的生存率與腫瘤的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。因此,探討食管癌淋巴道轉(zhuǎn)移機制,對了解腫瘤轉(zhuǎn)移的生物學(xué)行為,尋找新的腫瘤治療切入點等方面

2、有重要的臨床意義。
　　 Podoplanin,為腎小球上皮細胞整合膜蛋白。是新發(fā)現(xiàn)的特異性淋巴管標志物,是一種與淋巴管生成密切相關(guān)而與血管生成無關(guān)的黏蛋白。鼠抗人D2-40單克隆抗體可以特異性識別表達于淋巴管內(nèi)皮上的Podoplanin。用于標記腫瘤組織中的淋巴管內(nèi)皮,具有較高的敏感性和特異性。VEGF-C(血管內(nèi)皮生長因子-C,vascular endothelial growthfactor-C,)為血管內(nèi)皮生長因子(VE

3、GF)家族的一個成員,是近年來新發(fā)現(xiàn)的促淋巴管生長因子,可以選擇性地引起淋巴管增生,誘導(dǎo)實體瘤內(nèi)或腫瘤周圍的淋巴管生成和/或擴張,促進腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因nm23定位于17號染色體的q21.3上,編碼核苷二磷酸激酶,是新近發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因,在大多數(shù)惡性腫瘤中nm23低水平表達者易發(fā)生轉(zhuǎn)移。現(xiàn)有研究表明,nm23基因表達率的降低與食管癌的轉(zhuǎn)移有一定的關(guān)系,且nm23基因的陽性表達與食管癌患者的預(yù)后密切相關(guān),nm23

4、基因表達陰性的病人的存活率明顯低于表達陽性的病人,但nm23與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系不清,因此nm23在食管癌中的作用仍需進一步探討。
　　 本實驗通過檢測nm23、VEGF-C和Podoplanin在食管鱗癌組織及正常食管組織中的表達,探討nm23、VEGF-C和Podoplanin與食管癌淋巴管生成和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。
　　 方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法,DAB顯色。檢測74例食管鱗癌及其切緣正常組織中nm23、VEGF-

5、C和Podoplanin的表達水平,并分析其與食管癌患者年齡、性別；組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤深度等臨床病理各因素的關(guān)系。
　　 nm23結(jié)果判定:nm23蛋白為在細胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細胞,陽性細胞數(shù)<20％為陰性,陽性細胞數(shù)≥20％陽性。
　　 VEGF-C結(jié)果判定:VEGF-C定位于細胞漿,胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性,陽性細胞數(shù)<10％為陰性,陽性細胞數(shù)≥10％為陽性。
　　 Podoplanin淋巴

6、管密度(LVD)的判定方法:參照Kenney等的報道方法,先在低倍(10x)視野下選取腫瘤中淋巴管最密集的區(qū)域,再在高倍(40x)視野下計數(shù)Podoplanin染色陽性的淋巴管數(shù),每例讀數(shù)3個視野,并求其平均值作為LVD。
　　 統(tǒng)計方法
　　 采用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件,計量資料采用t檢驗,計數(shù)資料采用X2檢驗,以p<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1 nm23、VEGF-C和P

7、odoplanin在食管鱗癌組織中的表達
　　 (1)nm23在食管鱗癌組織中的表達
　　 食管癌組織中nm23蛋白陽性表達率為71.6％,正常組織中nm23蛋白陽性表達率為87.5％,兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。nm23在食管癌組織高、中分化組和低分化組陽性表達率分別為78.6％和50.0％；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組nm23蛋白陽性表達率分別為57.6％和82.9％。在組織分化和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組差

8、異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),而與年齡、性別及外膜浸潤無明顯關(guān)系(p>0.05)。
　　 (2)VEGF-C在食管鱗癌組織中的表達
　　 食管癌組織中VEGF-C蛋白陽性表達率為58.1％,明顯高于食管正常組織中12.5％的表達率；在高、中分化組VEGF-C蛋白陽性表達率66.1％,高于低分化組的33.3％；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組VEGF-C蛋白表達率分別為72.7％和46.3％。VEGF-C表達與組織分化和

9、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)(p<0.05),而與年齡、性別及外膜浸潤無明顯關(guān)系(p>0.05)。
　　 (3)Podoplanin在食管鱗癌組織中的表達
　　 Podoplanin表達于腫瘤和正常組織新生淋巴管內(nèi)皮,使毛細淋巴管內(nèi)皮細胞胞漿呈棕黃色。淋巴管密度LVD在正常食管組織和食管癌組織中分別為3.13±1.36、7.65±3.37；在食管癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的LVD分別為7.14±3.25和4.23±1.6

10、2；食管鱗癌組織中LVD與組織分化和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)(p<0.05),與年齡、性別、組織分化及外膜浸潤無關(guān)(p>0.05)。
　　 2食管鱗狀細胞癌組織中nm23和VEGF—C表達與LVD的相關(guān)性:
　　 VEGF-C陽性表達的43例食管癌組織中LVD為8.73±2.83,31例VEGF-C陰性表達的食管癌組織中LVD為6.16±3.53； nm23陽性表達的53例食管癌組織中LVD為7.83±3.32,21例nm

11、23陰性表達的食管癌組織中LVD為7.19±3.51。
　　 VEGF-C陽性表達的食管癌組織中LVD與陰性表達的LVD比較差異顯著(p=0.001),而nm23陽性表達的食管癌組織中LVD與nm23陰性表達的LVD比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.464)。
　　 3食管癌組織中nm23與VEGF-C表達的相關(guān)性
　　 食管癌組織中nm23表達與VEGF-C表達無明顯相關(guān)性,r=-0.048,p=0.677。

12、>　　 結(jié)論:
　　 1 VEGF-C在食管癌表達明顯增高,VEGF-C和LVD均與食管癌的組織分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)；且VEGF-C和LVD有明顯相關(guān)性；
　　 2 nm23在食管癌表達與其分化和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性,提示nm23與食管癌的組織分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)；但與LVD無關(guān);
　　 3 nm23與VEGF-C在食管癌的發(fā)生發(fā)展過程中無相關(guān)性;
　　 4 VEGF-C和LVD是腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和