MTA1、nm23-H1、及E-cadherin在食管鱗癌組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、近年來，相繼克隆出多種與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因，其中腫瘤轉(zhuǎn)移基因(metastasis-associated gene 1，MTAl)是研究發(fā)現(xiàn)的與信號(hào)傳導(dǎo)及基因調(diào)節(jié)有關(guān)的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因。研究已證實(shí)人MTAl蛋白含有一些基因調(diào)節(jié)蛋白和結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)，而在腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移過程中，MTAl基因產(chǎn)物可能在信號(hào)傳導(dǎo)途徑中發(fā)揮著重要作用。目前大量的研究表明MTAl與多種惡性腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。轉(zhuǎn)移抑制基因(non-metastatic g

2、ene23-Hl，nm23-H1)是一種腫瘤轉(zhuǎn)移表型抑制相關(guān)基因，其編碼產(chǎn)物為二磷酸核苷激酶(nucleoside diphosphate kinase，NDPK)，此酶參與體內(nèi)三磷酸核苷的生成，一個(gè)亞基的失活使NDPK比例失衡，NTP產(chǎn)生不足，影響微管聚合，導(dǎo)致染色體裂變和非整倍體的形成，促進(jìn)了腫瘤的轉(zhuǎn)移。有研究表明nm23-Hl基因可通過抑制細(xì)胞對(duì)血小板源性生長因子、胰島素樣生長因子-Ⅰ反應(yīng)而影響細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，從而抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移過程。

3、研究證實(shí)在多種高轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤，nm23-Hl基因發(fā)生突變、缺失或表達(dá)降低，表明nm23-Hl與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移潛能密切相關(guān)。上皮鈣黏素(E-cadherin，E-cad)屬于細(xì)胞黏附分子家族成員中跨膜蛋白亞型的一種，主要存在于上皮細(xì)胞，其陽性表達(dá)有抑制癌轉(zhuǎn)移的功能。E-cad表達(dá)下降或缺失，細(xì)胞間的相互黏附能力下降，造成腫瘤細(xì)胞容易分散而向外周浸潤生長，從而脫離原發(fā)灶發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)，E-cad表達(dá)的下調(diào)或缺失是腫瘤重要的惡性生物

4、學(xué)行為，提示E-cad的表達(dá)程度可以作為惡性腫瘤轉(zhuǎn)移能力強(qiáng)弱的指標(biāo)之一。 中國是世界上食管癌發(fā)病率和死亡率最高的國家，河南省食管痛發(fā)病率和死亡率均居中國首位，而浸潤、轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致食管癌患者死亡的主要原因，因此探討食管癌的浸潤、轉(zhuǎn)移機(jī)制已成為研究的熱點(diǎn)之一。有關(guān)MTAl、nm23-Hl及E-cad在食管鱗癌組織中的表達(dá)及意義的研究，至今國內(nèi)外尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本研究采用免疫組化SP法，分別觀察了高發(fā)區(qū)49例食管癌組織、30例癌旁非典型

5、增生組織及49例止常食管黏膜上皮組織中MTAl、nm23-Hl及E-cad蛋白的表達(dá)情況，三者的聯(lián)合檢測為進(jìn)一步闡明食管癌的浸潤、轉(zhuǎn)移機(jī)制，尋找抑制食管癌浸潤、轉(zhuǎn)移的有效方法，提高食管癌患者的生存時(shí)間、降低死亡率提供了理論基礎(chǔ)。材料組織標(biāo)本系食管癌高發(fā)區(qū)河南省安陽市腫瘤醫(yī)院及鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2004年9月至2004年11月食管癌新鮮手術(shù)切除標(biāo)本49例，每例手術(shù)標(biāo)本分別在癌灶、癌旁、正常組織三處取材。病理證實(shí)均為鱗狀細(xì)胞癌。選取全部4

6、9例癌組織、30例癌旁非典型增生組織和49例正常食管黏膜上皮組織作為本研究的觀察對(duì)象。49例食管癌標(biāo)本按有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分為：有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(20例)和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(29例)；按浸潤深度分為：淺肌層組(10例)、深肌層組(15例)及外膜組(24例)；按發(fā)生發(fā)展可分為：食管癌組(49例)、癌旁非典型增生組(30例)及正常食管黏膜組(49例)。全部標(biāo)本經(jīng)10％甲醛固定，石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片，以備免疫組織化學(xué)用。 方法

7、1．采用免疫組化SP法分別對(duì)49例食管癌組織、30例癌旁非典型增生組織及49例正常食管黏膜上皮組織中MTAl、nm23-Hl及E-cad蛋白的表達(dá)進(jìn)行檢測。 2．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。陽性率之間的比較采用X<'2>檢驗(yàn)(chi-square)；兩變量之間的關(guān)系分析采用spearman等級(jí)相關(guān)分析表示，以a=0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。 結(jié)果 1．正常食管黏膜上皮組織MTAl蛋白陽

8、性表達(dá)率為0％(0/49)，非典型增生組織MTAl蛋白陽性表達(dá)率為26.67％(8/30)，食管痛組織中MTAl蛋白陽性表達(dá)率為63.27％(31/49)。癌組織MTAl蛋白陽性表達(dá)率與相應(yīng)的癌旁非典型增生組織及正常食管黏膜上皮組織兩兩相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2．正常食管黏膜上皮組織nm23-Hl蛋白陽性表達(dá)率為100％(49/49)，非典型增生組織nm23-Hl蛋白陽性表達(dá)率為66.67％(20/30)，食

9、管癌組織中 nm23-HI蛋白陽性表達(dá)率為46.93％(23/49)。癌組織nm23-Hl蛋白陽性表達(dá)率與相應(yīng)的癌旁非典型增生組織及正常食管黏膜上皮組織兩兩相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3．食管癌組織、非典型增生組織和正常食管黏膜上皮組織E-cad蛋白陽性表達(dá)率分別為46.89％(22/49)、70％(21/30)和100％(49/49)，癌組織E-cad蛋白陽性表達(dá)率與相應(yīng)的癌旁非典型增生組織及正常食管黏膜上皮組

10、織兩兩相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4．20例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移食管鱗癌組織MTAl蛋白陽性表達(dá)率為80％(16/20)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例食管鱗癌組織MTAl蛋白陽性表達(dá)率為51.72％(15/29)，兩組問食管鱗癌組織MTAl蛋白陽性表達(dá)率差異有顯著性(P<0.05)。 5．20例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移食管鱗癌組織nm23-Hl蛋白陽性表達(dá)率為30％(6/20)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例食管鱗癌組織nm23-Hl蛋白陽性

11、表達(dá)率為62.07％(18/29)，兩組間食管鱗癌組織nm23-Hl蛋白陽性表達(dá)率差異有顯著性(P<0.05)。 6.20例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移食管鱗癌組織E-cad蛋白陽性表達(dá)率為25％(5/20)，而無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例食管鱗癌組織E-cad蛋白陽性表達(dá)率為58.62％(17/29)，兩組問食管鱗癌組織E-cad蛋白陽性表達(dá)率差異有顯著性(P<0.05)。 7．浸潤淺肌層、深肌層和食管外膜的食管鱗癌組織中MTAl蛋白陽性表達(dá)

12、率分別為：40％(4/10)、46.67％(7/15)和83.33％(20/24)，浸潤外膜的食管鱗癌組織MTAl蛋白陽性表達(dá)率明顯高于前兩者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而浸潤深肌層的食管鱗癌組織中：MTAl蛋白陽性表達(dá)率與淺肌層組相比差異無顯著性(P>0.05)。 8．浸潤淺肌層、深肌層和食管外膜的食管鱗癌組織中nm23-Hl蛋白陽性表達(dá)率分別為：80﹪(8/10)、40％(6/15)和37.5％(9/24)，浸潤淺肌

13、層的食管鱗癌組織nm23-Hl蛋白陽性表達(dá)率明顯高于后兩者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而浸潤深肌層的食管鱗癌組織中nm23-Hl蛋白陽性表達(dá)率與外膜組相比差異無顯著性(P>0.05)。 9．浸潤淺肌層、深肌層和食管外膜的食管鱗癌組織中E-cad蛋白陽性表達(dá)率分別為：90％(9/10)、46.67％(7/15)和25％(6/24)，浸潤淺肌層的食管鱗癌組織E-cad蛋白陽性表達(dá)率明顯高于后兩者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0

14、5)，而浸潤深肌層的食管鱗癌組織中E-cad蛋白陽性表達(dá)率_卜外膜組相比差異無顯著性(P>0.05)。 10．MTAl、nm23-Hl及E-cad蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)相關(guān)性經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，前者與后兩者之間均呈負(fù)相關(guān)(P<0.01)，后兩者之間呈正相關(guān)(P<0.01)。 結(jié)論 1．正常食管黏膜上皮組織、癌旁非典型增生組織及食管鱗癌組織中MTAl蛋白陽性表達(dá)率均依次升高，且正常食管黏膜上皮組織、癌旁非典型增生組織及癌組織

15、中MTAl蛋白陽性表達(dá)問相比，差異有顯著性，表明MTAl與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。 2．MTAl在轉(zhuǎn)移組食管鱗癌組織中的蛋白陽性表達(dá)高于無轉(zhuǎn)移組，差異有顯著性，提示MTAl蛋白表達(dá)與食管鱗癌轉(zhuǎn)移有關(guān)。 3．正常食管黏膜上皮組織、癌旁非典型增生組織及食管鱗癌組織中nm23-Hl蛋白、E-cad蛋白陽性表達(dá)率均依次降低，且正常食管黏膜上皮組織、癌旁非典型增生組織及癌組織中nm23-Hl蛋白、E-cad蛋白陽性表達(dá)間相比，差異

16、有顯著性，表明nm23-Hl、E-cad蛋白的表達(dá)與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。 4．nm23-Hl及E-cad在轉(zhuǎn)移組食管鱗癌組織中的蛋白陽性表達(dá)率低于無轉(zhuǎn)移組，差異有顯著性，提示nm23-Hl及E-cad蛋白的表達(dá)與食管鱗癌轉(zhuǎn)移有關(guān)。 5．MTAl在不同浸潤深度的食管鱗癌組織中的蛋白陽性表達(dá)率不同，隨著癌細(xì)胞浸潤深度的加深，癌組織中的蛋白陽性表達(dá)率逐漸升高，且浸潤至食管外膜層的癌組織中的蛋白陽性表達(dá)率明顯高于浸潤淺肌層和

17、深肌層的相應(yīng)組織。提示MTAl蛋白表達(dá)與食管鱗癌浸潤有關(guān)。 6．nm23-Hl及E-cad在不同浸潤深度的食管鱗癌組織中的蛋白陽性表達(dá)率不同，隨著癌細(xì)胞浸潤深度的加深，癌組織中的蛋白陽性表達(dá)率逐漸降低，且浸潤至食管淺肌層的癌組織中的蛋白陽性表達(dá)率明顯高于浸潤深肌層和外膜層的相應(yīng)組織。提示nm23-Hl、E-cad蛋白的表達(dá)與食管鱗癌浸潤有關(guān)。 7．MTAl、nm23-Hl及E-cad蛋白在食管鱗癌組織中的表達(dá)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析